复方丹参片中人参皂苷和三七皂苷的测定

摘要：本文建立了复方丹参片中人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1和三七皂苷R1的HPLC测定方法。结果表明，采用色谱柱Shim-pack GISS C18(4.6×250 mm，5 μm )分析人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1和三七皂苷R1，人参皂苷Rg1峰的理论塔板数为188344，远大于《中国药典》要求的6000；人参皂苷Rg1、人参皂苷Re的分离度为3.136，远大于《中国药典》要求的分离度1.8；并且标准品溶液和供试品溶液的保留时间和峰面积RSD小于2% (n=3)，满足《中国药典》要求。此方法可为复方丹参片中人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1和三七皂苷R1的检测提供参考。
关键词：复方丹参片 人参皂苷 三七皂苷 Shim-pack GISS C18 HPLC
 

1. 实验部分
1.1 实验仪器及耗材

Shimadzu LC-20AD 高效液相色谱仪；
色谱柱：Shim-pack GISS C18 (4.6×250 mm，5 μm；P/N：227-30061-07)；
SHIMSEN Arc Disc HPTFE针式过滤器（P/N：380-00341-05）；
LC/MS认证样品瓶LabTotal Vial（P/N：227-34001-01）；

SHIMSEN Pipet移液枪：SHIMSEN Pipet PMII-10（P/N：380-00751-02）；
SHIMSEN Pipet PMII-100（P/N：380-00751-04）；
SHIMSEN Pipet PMII-1000（P/N：380-00751-06）。

1.2 分析条件

色谱柱：Shim-pack GISS C18 (4.6×250 mm，5 μm；P/N：227-30061-07)
柱温：30℃
检测波长：203 nm
流速：1.0 mL/min
进样量：20 µL
流动相：A：水 B：乙腈

1.3 对照品溶液的制备

取人参皂苷Rg1对照品、人参皂苷Rb1对照品、三七皂苷R1、人参皂苷Re对照品适量，精密称定，加70%甲醇制成每1mL含人参皂苷Rg1 及人参皂苷Rb1各0.2 mg，三七皂苷R1及人参皂苷Re各 0.05 mg的混合溶液，即得。

1.4 供试品溶液的制备

取本品10片，除去包衣，精密称定，研细，取约1 g，精密称定，精密加入70%甲醇50 mL，称定重量，超声处理（功率250W，频率33kHz）30分钟，放冷，再称定重量，用70%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

2. 结果及讨论

按照上述色谱条件（1.2）进行采集，对照品溶液色谱图和样品色谱图如下：
对照品溶液：

供试品溶液：

重现性
对照品溶液重现性

供试品溶液重现性

3. 结论

本文建立了复方丹参片中人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1和三七皂苷R1的HPLC测定方法。结果表明，采用色谱柱Shim-pack GISS C18(4.6×250 mm，5 μm )分析人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1和三七皂苷R1，人参皂苷Rg1峰的理论塔板数为188344，远大于《中国药典》要求的6000；人参皂苷Rg1、人参皂苷Re的分离度为3.136，远大于《中国药典》要求的分离度1.8；并且标准品溶液和供试品溶液的保留时间和峰面积RSD小于3% (n=3)，满足《中国药典》要求。此方法可为复方丹参片中人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1和三七皂苷R1的检测提供参考。