UHPLC分析盐酸特比萘芬有关物质

摘要：本文建立了盐酸特比萘芬有关物质分析的UHPLC测定方法。参考2020版《中国药典》色谱分析条件并优化，采用色谱柱Shim-pack Scepter C18-120和Shim-pack GIST C18-AQ，对盐酸特比萘芬有关物质的系统适用性溶液、供试品溶液、对照溶液和灵敏度溶液进行分析，结果表明，系统适用性溶液色谱图中，在相对保留时间0.8 ~ 1.2之间有三个较大杂质峰，且相对保留时间分别约为0.87，0.95和1.1，杂质峰和主成分之间的分离度均大于2.0；灵敏度溶液色谱图中，主成分峰高的信噪比大于5，满足《中国药典》要求。此方法可为盐酸特比萘芬有关物质分析提供参考。
关键词：特比萘芬 Shim-pack Scepter C18-120 Shim-pack GIST C18-AQ UHPLC
 

1. 实验部分
1.1 实验仪器及耗材

Shimadzu LC-40B X3超高效液相色谱仪；
色谱柱：Shim-pack Scepter C18-120（1.9 μm，2.1×100 mm；P/N：227-31012-05；S/N：115FB00012）；

Shim-pack GIST C18-AQ（1.9 μm，2.1×100 mm；P/N：227-30807-02；S/N：19I06424）；

SHIMSEN Arc Disc HPTFE针式过滤器（P/N：380-00341-05）；
LC/MS认证样品瓶LabTotal Vial（P/N：227-34001-01）；

SHIMSEN Pipet移液枪：SHIMSEN Pipet PMII-10（P/N：380-00751-02）；
SHIMSEN Pipet PMII-100（P/N：380-00751-04）；
SHIMSEN Pipet PMII-1000（P/N：380-00751-06）。

1.2 样品溶液制备

1.2.1 溶剂

乙腈-水（1:1）

1.2.2 系统适用性溶液

取盐酸特比萘芬适量，加溶剂溶解并稀释制成每1 mL中约含1 mg的溶液，置紫外光灯254 nm下照射1小时。

1.2.3 供试品溶液

取本品适量，加溶剂溶解并稀释制成每1 mL中约含0.5 mg的溶液。

1.2.4 对照溶液

精密量取供试品溶液适量，用溶剂定量稀释制成每1 mL中约含5 μg的溶液。

1.2.5 灵敏度溶液

精密量取对照溶液适量，用溶剂定量稀释制成每1 mL中约含0.05 μg的溶液。

1.3 分析条件及结果

1.3.1 分析条件

色谱柱：Shim-pack Scepter C18-120 （1.9 μm，2.1×100 mm；P/N：227-31012-05；S/N：115FB00012）
柱温：40 ℃
流速：0.3 mL/min
检测波长：280 nm
进样量：6 µL
流动相：A：三乙胺缓冲溶液-甲醇-乙腈（30:42:28）；

B：三乙胺缓冲溶液-甲醇-乙腈（5:57:38）
三乙胺缓冲溶液：0.2%三乙胺溶液，用冰醋酸调节pH值至7.5

梯度条件：

实验结果

按照上述色谱条件（1.3.1）进行采集，色谱图如下：
系统适用性溶液：

供试品溶液：

对照溶液：

灵敏度溶液：

1.3.2 分析条件

色谱柱：Shim-pack GIST C18-AQ（1.9 μm，2.1×100 mm）
柱温：40 ℃
流速：0.3 mL/min
检测波长：280 nm
进样量：6 µL
流动相：A：三乙胺缓冲溶液-甲醇-乙腈（30:42:28）；

B：三乙胺缓冲溶液-甲醇-乙腈（5:57:38）
三乙胺缓冲溶液：0.2%三乙胺溶液，用冰醋酸调节pH值至7.5

梯度条件：

实验结果

按照上述色谱条件（1.3.2）进行采集，色谱图如下：
系统适用性溶液：

供试品溶液：

对照溶液：

灵敏度溶液：

2. 结论

参考2020版《中国药典》色谱分析条件并优化，采用色谱柱Shim-pack Scepter C18-120和Shim-pack GIST C18-AQ，对盐酸特比萘芬有关物质的系统适用性溶液、供试品溶液、对照溶液和灵敏度溶液进行分析，结果表明，系统适用性溶液色谱图中，在相对保留时间0.8 ~ 1.2之间有三个较大杂质峰，且相对保留时间分别约为0.87，0.95和1.1，杂质峰和主成分之间的分离度均大于2.0；灵敏度溶液色谱图中，主成分峰高的信噪比大于5，满足《中国药典》要求。此方法可为盐酸特比萘芬有关物质分析提供参考。