黄体酮有关物质分析

摘要：本文建立了黄体酮有关物质分析的HPLC测定方法。参照《中国药典》中色谱分析条件，采用色谱柱SHIMSEN Ankylo C8-AQ，对黄体酮有关物质系统适用性溶液、供试品溶液、对照溶液、灵敏度溶液进行分析，系统适用性溶液色谱图中，黄体酮峰的保留时间为12.651分钟，黄体酮峰与相对保留时间约为1.1的降解产物峰之间的分离度为4.589，大于4.0，满足《中国药典》需求，此方法可为黄体酮有关物质分析提供参考。
关键词：黄体酮 有关物质 SHIMSEN Ankylo C8-AQ HPLC
 

1. 实验部分
1.1 实验仪器及耗材

Shimadzu LC-20AD高效液相色谱仪；
色谱柱：SHIMSEN Ankylo C8-AQ（4.6×250 mm，5 μm；P/N：380-01203-08；S/N：6AZ06766）；
SHIMSEN Disc针式过滤器（P/N：380-00341）；
SHIMSEN Arc Disc HPTFE针式过滤器（P/N：380-00341-05）；
LC/MS认证样品瓶LabTotal Vial（P/N：227-34001-01）；

SHIMSEN Pipet移液枪：SHIMSEN Pipet PMII-10（P/N：380-00751-02）；
SHIMSEN Pipet PMII-100（P/N：380-00751-04）；
SHIMSEN Pipet PMII-1000（P/N：380-00751-06）。

1.2 溶液的制备

1.2.1 系统适用性溶液

取黄体酮25 mg，置25 mL量瓶中，加0.1 mol/L氢氧化钠甲醇溶液10 mL使溶解，置60 ℃水浴中保温4小时，放冷，用1 mol/L盐酸溶液调节至中性，用甲醇稀释至刻度，摇匀。

1.2.2 供试品溶液

取本品，加甲醇溶解并稀释制成每1 mL中约含1 mg的溶液。

1.2.3 对照溶液

供试品溶液用甲醇稀释100倍。

1.2.4 灵敏度溶液

供试品溶液稀释2000倍。

1.3 分析条件

色谱柱：SHIMSEN Ankylo C8-AQ（4.6×250 mm，5 μm；P/N：380-01203-08；S/N：6AZ06766）；
柱温：30 ℃
柱流速：1.0 mL/min；
检测波长：241 nm；
进样量：10 μL；
流动相：以甲醇-乙腈-水（25:35:40）为流动相。

2. 实验结果

按照上述色谱条件（1.3）进行采集，色谱图如下：
系统适用性溶液：

供试品溶液：

对照溶液：

灵敏度溶液：

3. 结论

本文建立了黄体酮有关物质分析的HPLC测定方法。参照《中国药典》中色谱分析条件，采用色谱柱SHIMSEN Ankylo C8-AQ，对黄体酮有关物质系统适用性溶液、供试品溶液、对照溶液、灵敏度溶液进行分析，系统适用性溶液色谱图中，黄体酮峰的保留时间为12.651分钟，黄体酮峰与相对保留时间约为1.1的降解产物峰之间的分离度为4.589，大于4.0，满足《中国药典》需求，此方法可为黄体酮有关物质分析提供参考。