食品中维生素D的测定（第2法）

摘要：本文建立了维生素D2和维生素D3的HPLC测定方法。参照新国标《食品中维生素D的测定》征求意见稿中第2法二维色谱条件，采用色谱柱 ShimNexS-C18-PAH分析维生素D2和维生素D3，结果显示，2个化合物峰形对称维生素D2和维生素D3达到基线分离，满足日常检测需求。此方法可为食品中维生素D2和D3的检测提供参考。
关键词：食品 维生素 D2 维生素 D3 ShimNex S-C18-PAH HPLC
 

1. 实验部分
1.1 实验仪器及耗材

Shimadzu LC-40D 高效液相色谱仪；
色谱柱：ShimNex S-C18-PAH (4.6×150 mm， 3 μm； P/N： 380-01247-14)；
纯水机： PR-FP-0120α-MT1（+ 60L 水箱 + 取水器）；
SHIMSEN Arc Disc HPTFE 针式过滤器（P/N：380-00341-05）；
LC/MS 认证样品瓶 LabTotal Vial（P/N：227-34001-01）；
SHIMSEN Pipet 移液枪：SHIMSEN Pipet PMII-10（P/N：380-00751-02）；
SHIMSEN Pipet PMII-100（P/N：380-00751-04）；
SHIMSEN Pipet PMII-1000（P/N：380-00751-06）；

1.2 混合对照品溶液的制备

分别称取维生素 D2 对照品和维生素D3对照品适量，加甲醇制成每1 mL 各含 1 mg 的单标溶液。分别精密量取维生素D2和维生素D3单标溶液适量，用95%乙腈水稀释制成混合对照品溶液，使得维生素D2和维生素D3的最终浓度均为100 ng/mL。

1.3 分析条件

色谱柱：ShimNex S-C18-PAH (4.6×150 mm；3 μm； P/N： 380-01247-14)
柱温：35℃
检测波长：264 nm
流速：0.4 mL/min
进样量：100 µL
流动相：95%乙腈水： 甲醇=40： 60

2. 实验结果

按照上述色谱条件（1.3）进行采集，混合对照品溶液色谱图如下：

混合对照品溶液

重现性

对照品溶液重现性

3. 结论

本文建立了维生素D2和维生素D3的HPLC测定方法。参照新国标《食品中维生素D的测定》征求意见稿中第2法二维色谱条件，采用色谱柱ShimNexS-C18-PAH分析维生素D2和维生素 D3，结果显示，2个化合物峰形对称，维生素D2和维生素D3达到基线分离，满足日常检测需求。此方法可为食品中维生素D2和D3的检测提供参考。