铁皮石斛中甘露糖的测定

摘要：本文建立了铁皮石斛中甘露糖的HPLC测定方法。参照2020版《中国药典》色谱条件，采用色谱柱Shim-pack GIS C18分析铁皮石斛中甘露糖，结果显示，甘露糖峰形对称，理论塔板数大于4000，甘露糖与相邻杂质峰基线分离，满足《中国药典》要求。此方法可为铁皮石斛中甘露糖的检测提供参考。
关键词：铁皮石斛 甘露糖 Shim-pack GIS C18 HPLC
 

1. 实验部分
1.1 实验仪器及耗材

Shimadzu LC-20AD高效液相色谱仪；
色谱柱：Shim-pack GIS C18（5 μm，4.6×250 mm；P/N：227-30106-08）；
纯水机：PR-FP-0120α-MT1（+ 60L水箱 + 取水器）；
SHIMSEN Arc Disc HPTFE针式过滤器（P/N：380-00341-05）；
LC-MS认证样品瓶LabTotal Vial（P/N：227-34001-01）；

SHIMSEN Pipet移液枪：SHIMSEN Pipet PMII-10（P/N：380-00751-02）；
SHIMSEN Pipet PMII-100（P/N：380-00751-04）；
SHIMSEN Pipet PMII-1000（P/N：380-00751-06）。

1.2 对照品溶液的制备

取盐酸氨基葡萄糖适量，精密称定，加水制成每1 mL含12 mg的溶液，作为内标溶液。另取甘露糖对照品约10 mg，精密称定，置100 mL量瓶中，精密加入内标溶液1 mL，加水适量使溶解并稀释至刻度，摇匀，吸取400 μL，加0.5 mol/L的PMP（1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮）甲醇溶液与0.3 mol/L的氢氧化钠溶液各400 μL，混匀，70 ℃水浴反应100分钟。再加0.3 mol/L的盐酸溶液500 μL，混匀，用三氯甲烷洗涤3 次，每次2 mL，弃去三氯甲烷液，水层离心后，即得。

1.3 供试品溶液的制备

取本品粉末（过三号筛）约0.12 g，精密称定，置索氏提取器中，加80%乙醇适量，加热回流提取4小时，弃去乙醇液，药渣挥干乙醇，滤纸筒拆开置于烧杯中，加水100 mL，再精密加入内标溶液2 mL，煎煮1小时并时时搅拌，放冷，加水补至约100 mL，混匀，离心，吸取上清液1 mL，置安部瓶或顶空瓶中，加3.0 mol/L的盐酸溶液0.5 mL，封口，混匀，110 ℃ 水解1小时，放冷，用3.0 mol/L的氢氧化钠溶液调节pH值至中性，吸取400 μL，照对照品溶液制备方法，自“加0.5 mol/L的PMP甲醇溶液”起，依法操作，即得。

1.4 分析条件

色谱柱：Shim-pack GIS C18（5 μm，4.6×250 mm；P/N：227-30106-08）
柱温：30℃
检测波长：249 nm
流速：1.0 mL/min
进样量：10 µL
流动相：甲醇：0.5%冰醋酸溶液=20：80

2. 实验结果

按照上述色谱条件（1.4）进行采集，对照品溶液和供试品色谱图如下：
对照品溶液

供试品溶液

重现性
对照品溶液重现性

供试品溶液重现性

3. 结论

本文建立了维C银翘片中对乙酰氨基酚项下对乙酰氨基酚的HPLC测定方法。参照2020版《中国药典》色谱条件，采用色谱柱ShimNex CS C18分析维C银翘片中对乙酰氨基酚，结果显示，对乙酰氨基酚峰形对称，理论塔板数大于1500，对乙酰氨基酚与相邻杂质峰基线分离，满足《中国药典》要求。此方法可为维C银翘片中对乙酰氨基酚的检测提供参考。