食品（面粉）中偶氮甲酰胺的测定

摘要：本文建立了食品（面粉）中偶氮甲酰胺的HPLC快速测定方法。参照GB 5009.283-2021中色谱条件并进行优化，采用色谱柱ShimNex CS C18分析食品（面粉）中偶氮甲酰胺，结果显示，一针分析时间为15分钟，分析时间短，偶氮甲酰胺衍生物峰形对称，且偶氮甲酰胺衍生物与相邻杂质峰基线分离，满足日常检测需求。此方法可为食品中偶氮甲酰胺的检测提供参考。
关键词：食品 面粉 偶氮甲酰胺 ShimNex CS C18 HPLC
 

1. 实验部分
1.1 实验仪器及耗材

Shimadzu LC-20AD高效液相色谱仪；
色谱柱：ShimNex CS C18（5 μm，4.6×150 mm；P/N：380-01230-02）；
纯水机：PR-FP-0120α-MT1（+ 60L水箱 + 取水器）；
SHIMSEN Arc Disc HPTFE针式过滤器（P/N：380-00341-05）；
LC-MS认证样品瓶LabTotal Vial（P/N：227-34001-01）；

SHIMSEN Pipet移液枪：SHIMSEN Pipet PMII-10（P/N：380-00751-02）；
SHIMSEN Pipet PMII-100（P/N：380-00751-04）；
SHIMSEN Pipet PMII-1000（P/N：380-00751-06）。

1.2 衍生化的标准工作溶液的制备

标准储备溶液：准确称取偶氮甲酰胺标准品50 mg（精确至0.1mg），用N，N-二甲基甲酰胺溶解并定容至500 mL，混匀，配制成浓度为100 μg/mL的标准储备溶液。

空白基质提取溶液：使用空白小麦粉按照1.3方法进行试样处理，得到空白基质提取溶液。

标准工作溶液：吸取100 μg/mL的标准储备液1000 μL于10 mL容量瓶中，用空白基质提 取溶液定容至刻度，混匀，配制成浓度为10.0 μg/mL的标准系列工作液。临用前配制。

标准工作溶液的衍生化：同1.3中试样溶液的衍生化方法。

1.3 试样溶液的制备

试样处理：称取2.50 g试样，置于50 mL具塞离心管中，加入1 g无水硫酸镁，混合均匀，准确加入25.0 mL N，N-二甲基甲酰胺，在涡旋振荡器上充分混合，振荡提取20 min，静置，10000 r/min离心5min，取上清液待衍生。

试样溶液的衍生化：吸取1.00 mL滤液，置于10 mL具塞离心管中，加入100 μL三苯基膦衍生溶液，于涡旋混合器上充分混合，25 ℃环境温度下，避光静置衍生18 h以上（若环境温度达不到要求，可在25 ℃可控温设备中进行衍生反应）。衍生液过0.22 μm 有机微孔滤膜后，供液相色谱仪测定（待测液在 25 ℃ 温度下60 h之内测定）。

1.4 分析条件

色谱柱：ShimNex CS C18（5 μm，4.6×150 mm；P/N：380-01230-02）
柱温：30℃
检测波长：230 nm
流速：1.0 mL/min
进样量：10 µL
流动相：A：水 B：甲醇

2. 实验结果

按照上述色谱条件（1.4）进行采集，衍生化的标准工作溶液和试样溶液色谱图如下：

衍生化的标准工作溶液

试样溶液

重现性

衍生化的标准工作溶液重现性

3. 结论

本文建立了食品（面粉）中偶氮甲酰胺的HPLC快速测定方法。参照GB 5009.283-2021中的色谱条件并进行优化，采用色谱柱ShimNex CS C18分析食品（面粉）中偶氮甲酰胺，结果显示，一针分析时间为15分钟，分析时间短，偶氮甲酰胺衍生物峰形对称，且偶氮甲酰胺衍生物与相邻杂质峰基线分离，满足日常检测需求。此方法可为食品中偶氮甲酰胺的检测提供参考。