食品中维生素B12的测定（第1法）

摘要：本文建立了食品中维生素B12的HPLC测定方法。参照国标GB 5009.285-2022中第一法色谱条件并进行优化，采用色谱柱ShimNex CS C18分析维生素B12，结果显示，维生素B12峰形对称，满足日常检测要求。此方法可为食品中维生素B12的检测提供参考。
关键词：食品 维生素B12 ShimNex CS C18 HPLC
 

1. 实验部分
1.1 实验仪器及耗材

Shimadzu LC-40D高效液相色谱仪；
色谱柱：ShimNex CS C18（5 μm，4.6×150 mm；P/N：380-01230-02）；
纯水机：PR-FP-0120α-MT1（+ 60L水箱 + 取水器）；
SHIMSEN Arc Disc HPTFE针式过滤器（P/N：380-00341-05）；
LC-MS认证样品瓶LabTotal Vial（P/N：227-34001-01）；

SHIMSEN Pipet移液枪：SHIMSEN Pipet PMII-10（P/N：380-00751-02）；
SHIMSEN Pipet PMII-100（P/N：380-00751-04）；
SHIMSEN Pipet PMII-1000（P/N：380-00751-06）。

1.2 维生素B12标准工作溶液的制备

准确量取维生素B12标准品母液适量，加水配制成每1 mL含200 ng的溶液，作为高浓度标准工作溶液；将上述高浓度标准工作溶液用水稀释成每1 mL含30 ng的溶液作为低浓度标准工作溶液，备用。

1.3 分析条件

色谱柱：ShimNex CS C18（5 μm，4.6×150 mm；P/N：380-01230-02）
柱温：40℃
检测波长：361 nm
流速：1.0 mL/min
进样量：100 µL
流动相： A：0.04%三氟乙酸溶液 B：乙腈

2. 实验结果

按照上述色谱条件（1.3）进行采集，标准工作溶液色谱图如下：

标准工作溶液（200 ng/mL）

标准工作溶液（30 ng/mL）

重现性

标准溶液（200 ng/mL）重现性

3. 结论

本文建立了食品中维生素B12的HPLC测定方法。参照国标GB 5009.285-2022色谱条件并进行优化，采用色谱柱ShimNex CS C18分析维生素B12，结果显示，维生素B12峰形对称，满足日常检测要求。此方法可为食品中维生素B12的检测提供参考。