烟酰胺单核苷酸、烟酰胺、ATP等5种化合物的分析

摘要：本文建立了烟酰胺、烟酰胺单核苷酸、AMP、ADP、ATP等5种化合物的HPLC测定方法。采用色谱柱Shim-pack Scepter C18-120进行分析，5种化合物的分离度良好，峰形和重现性良好，满足检测需求。此方法可为烟酰胺、烟酰胺单核苷酸、AMP、ADP、ATP等5种化合物的分析提供参考。
关键词：烟酰胺单核苷酸 烟酰胺 AMP ADP ATP Shim-pack Scepter C18-120 HPLC
 

1. 实验部分
1.1 实验仪器及耗材

Shimadzu LC-20AD高效液相色谱仪；
色谱柱：Shim-pack Scepter C18-120（3μm，4.6×150 mm；P/N：227-31016-05）；
纯水机：PR-FP-0120α-MT1（+ 60L水箱+取水器）；
SHIMSEN Arc Disc HPTFE针式过滤器（P/N：380-00341-05）；
LC-MS认证样品瓶LabTotal Vial（P/N：227-34001-01）；

SHIMSEN Pipet移液枪：SHIMSEN Pipet PMII-10（P/N：380-00751-02）；
SHIMSEN Pipet PMII-100（P/N：380-00751-04）；
SHIMSEN Pipet PMII-1000（P/N：380-00751-06）。

1.2 混合标准品溶液的制备

取ATP、ADP、AMP、烟酰胺、烟酰胺单核苷酸五种化合物适量，用流动相稀释制成各含100μg/mL的样品。

1.3 分析条件

色谱柱：Shim-pack Scepter C18-120（3μm，4.6×150 mm；P/N：227-31016-05）
柱温：40℃
检测器：PDA，254nm
流速：1.0 mL/min
进样量：5 µL
流动相：A：10mM四丁基氢氧化铵溶液于40mM磷酸二氢钾溶液（调节pH至6.2）B：甲醇. A：B=70:30

2. 实验结果

按照上述色谱条件（1.3）进行采集，混合标准品溶液色谱图如下：
混合标准品溶液：

混合标准品溶液重现性

3. 结论

本文建立了烟酰胺、烟酰胺单核苷酸、AMP、ADP、ATP 5种化合物的HPLC测定方法。采用色谱柱Shim-pack Scepter C18-120进行分析，5种化合物间分离度良好，峰形和重现性良好，满足检测需求。此方法可为烟酰胺、烟酰胺单核苷酸、AMP、ADP、ATP 5种化合物的分析提供参考。