苦参软膏中槐定碱的测定

摘要：本文建立了苦参软膏中苦参碱、氧化苦参碱、槐定碱和槐果碱含量测定的HPLC方法。参照2020版《中国药典》中色谱条件，采用色谱柱Shim-pack GIST C18进行分析，苦参碱、氧化苦参碱、槐定碱和槐果碱峰形良好，槐定碱理论塔板数高于5000，满足2020版《中国药典》要求。此方法可为苦参软膏中苦参碱、氧化苦参碱、槐定碱和槐果碱含量测定提供参考。
关键词：苦参软膏 苦参碱 氧化苦参碱 槐定碱 槐果碱 Shim-pack GIST C18 HPLC
 

1. 实验部分
1.1 实验仪器及耗材

Shimadzu LC-20AD高效液相色谱仪；
色谱柱：Shim-pack GIST C18(5μm，4.6×250 mm；P/N：227-30017-08)；
纯水机：PR-FP-0120α-MT1（+ 60L水箱 + 取水器）；
SHIMSEN Arc Disc HPTFE针式过滤器（P/N：380-00341-05）；
LC-MS认证样品瓶LabTotal Vial（P/N：227-34001-01）；

SHIMSEN Pipet移液枪：SHIMSEN Pipet PMII-10（P/N：380-00751-02）；
SHIMSEN Pipet PMII-100（P/N：380-00751-04）；
SHIMSEN Pipet PMII-1000（P/N：380-00751-06）。

1.2 对照品溶液的制备

取苦参碱、氧化苦参碱、槐定碱和槐果碱对照品适量，精密称定，加乙腈-0.1%磷酸溶液（三乙胺调pH值至8.0）（13：87）制成每1mL含苦参碱250µg、氧化苦参碱50µg、槐定碱250µg和槐果碱20µg的混合溶液，即得。

1.3 供试品溶液的制备

取本品0.2 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入乙腈-0.1%磷酸溶液（三乙胺调节pH值至8.0）（13：87）20 mL，称定重量，超声处理（功率300W，频率45kHz）30分钟，放冷，用乙腈-0.1%磷酸溶液（三乙胺调pH值至8.0）（13：87）补足减失的重量，滤过，取续滤液，即得。

1.4 分析条件

色谱柱：Shim-pack GIST C18(5μm，4.6×250 mm；P/N：227-30017-08)
柱温：40℃
检测器及波长：UV 220 nm
流速：1.0 mL/min
进样量：10 µL
流动相：A：0.1%磷酸溶液（三乙胺调pH值至8.0）B：乙腈

2. 实验结果

按照上述色谱条件（1.4）进行采集，对照品溶液和供试品溶液色谱图如下：
对照品溶液

供试品溶液

重现性
对照品溶液重现性

供试品溶液重现性

3. 结论

本文建立了苦参软膏中苦参碱、氧化苦参碱、槐定碱和槐果碱含量测定的HPLC方法。参照2020版《中国药典》中色谱条件，采用色谱柱Shim-pack GIST C18进行分析，苦参碱、氧化苦参碱、槐定碱和槐果碱峰形良好，槐定碱理论塔板数高于5000，满足2020版《中国药典》要求。此方法可为苦参软膏中苦参碱、氧化苦参碱、槐定碱和槐果碱含量测定提供参考。