鸡肉中环丙氨嗪的测定

摘要：本研究建立了鸡肉中环丙氨嗪的测定方法。参照GB31658.12-2021前处理方法，采用岛津的SHIMSEN Styra MCX产品对鸡肉样品样品进行净化，Shim-pack Scepter Diol-HILIC色谱柱进行分离，岛津LC-40 B X3检测分析。对空白样品加标后（添加浓度：25μg/kg），按照上述前处理方法处理后上机，平行3份样品考察回收率和RSD，结果显示，加标回收率为76.46%，RSD为7.29%，回收率高，重现性好。该方法为鸡肉中环丙氨嗪的测定提供参考。
关键词：SHIMSEN Styra MCX 鸡肉 环丙氨嗪 UHPLC
 

1. 实验部分
1.1 实验仪器及耗材

Shimadzu LC-40 B X3超高效液相色谱仪；
色谱柱：Shim-pack Scepter Diol-HILIC（1.9 μm，2.1×100 mm；P/N：227-31043-02）；
纯水机： PR-FP-0120α-MT1（ + 60L 水箱 + 取水器）；
固相萃取小柱： SHIMSEN Styra MCX（60 mg/3 mL； P/N： 380-00853-01）；
SHIMSEN Disc HPTFE 针式过滤器（ P/N： 380-00341）；
LC/MS认证样品瓶LabTotal Vial（P/N：227-34001-01）；

SHIMSEN Pipet移液枪：SHIMSEN Pipet PMII-10（P/N：380-00751-02）；
SHIMSEN Pipet PMII-100（P/N：380-00751-04）；
SHIMSEN Pipet PMII-1000（P/N：380-00751-06）。

1.2 分析条件

色谱柱：Shim-pack Scepter Diol-HILIC（1.9 μm，2.1×100 mm；P/N：227-31043-02）
流速：0.3mL/min
进样量：20μL
柱温：30℃
检测波长：214nm
流动相：A：2.5 mM乙酸铵水溶液（乙酸调pH至4.95）；B：乙腈；A：B=4：96

1.3 样品前处理

1.3.1 样品提取

取试料5g于50mL离心管中，加15mL提取液（1%三氯乙酸溶液：乙腈=15：85），振摇2min，于8000r/min离心3min，取出上清液，将残渣捣碎，加10mL提取液，按照上述操作重复提取1次，合并2次上清液，加20mL乙醇，摇匀，于45℃下减压浓缩至3~4mL，加5mL提取液，混匀，待净化。样品提取流程图见下图1。

1.3.2 样品净化

SHIMSEN Styra MCX 60mg/3mL
3mL甲醇、3mL水活化，弃去流出液；待净化液上样，弃去流出液；2mL0.1M盐酸水溶液、2mL乙腈清洗，弃去流出液；5mL5%氨水乙腈洗脱，收集流出液；45℃下减压浓缩至近干，加乙腈定容至1mL，涡旋混匀，过0.22μm HPTFE滤膜，供UHPLC分析。净化流程图见图2。

2. 实验结果

2.1 色谱图

2.2 鸡肉中环丙氨嗪UHPLC检测添加回收结果

将鸡肉空白样品进行25μg/kg浓度加标后，按照上述前处理方法处理后上机，平行3份样品考察回收率和RSD，具体结果如下：25μg/kg加标浓度的加标回收率为76.46%，RSD为7.29%。

3. 结论

本研究建立了鸡肉中环丙氨嗪的测定方法。参照GB31658.12-2021前处理方法，采用岛津的SHIMSEN Styra MCX产品对鸡肉样品样品进行净化，Shim-pack Scepter Diol-HILIC色谱柱进行分离，岛津LC-40 B X3检测分析。对空白样品加标后（添加浓度：25μg/kg），按照上述前处理方法处理后上机，平行3份样品考察回收率和RSD，结果显示，加标回收率为76.46%，RSD为7.29%，回收率高，重性好。该方法为鸡肉中环丙氨嗪的测定提供参考。