豇豆中灭蝇胺的测定

摘要：本研究建立了豇豆中灭蝇胺的测定方法。参照NY 1725-2009前处理方法并进行优化，采用岛津的SHIMSEN Styra MCX产品对豇豆样品进行净化，ShimNex HE NH2色谱柱进行分离，岛津LC-20AD检测 分析。对空白样品加标后（添加浓度：0.5 mg/kg），按照上述前处理方法处理后上机，平行3份样品考察回收率和RSD，结果显示，加标回收率为84.20-92.05%，RSD 4.49%，回收率高，重现性好。该方法为豇豆中灭蝇胺的测定提供参考。
关键词：SHIMSEN Styra MCX 豇豆 灭蝇胺 HPLC
 

1. 实验部分
1.1 实验仪器及耗材

Shimadzu LC-40D超高效液相色谱仪；
色谱柱：ShimNex HE NH2（5μm，4.6×250 mm；P/N：380-01244-33）；
纯水机： PR-FP-0120α-MT1（ + 60L 水箱 + 取水器）；
固相萃取小柱： SHIMSEN Styra MCX（150 mg/6 mL； P/N： 380-00853-07）；
SHIMSEN Disc HPTFE 针式过滤器（ P/N： 380-00341）；
LC/MS认证样品瓶LabTotal Vial（P/N：227-34001-01）；

SHIMSEN Pipet移液枪：SHIMSEN Pipet PMII-10（P/N：380-00751-02）；
SHIMSEN Pipet PMII-100（P/N：380-00751-04）；
SHIMSEN Pipet PMII-1000（P/N：380-00751-06）。

1.2 分析条件

色谱柱：ShimNex HE NH2（5 μm，4.6×250 mm；P/N：380-01244-33）
流速：1.0mL/min
进样量：10μL
柱温：30℃
检测波长：215nm
流动相：A：水；B：乙腈
梯度程序如下：

1.3 样品前处理

1.3.1 样品提取

取试料20g于100 mL离心管中，加50mL提取液（50mM乙酸铵：乙腈=20：80），均质2min，于4200 r/min离心5min，取出上清液，向残渣中继续加30mL上述提取液，振摇1min，于4200 r/min离心5min，取出上清液，合并2次上清液，加上述提取液定容至100mL，用移液管准确移取10mL提取液于250mL旋蒸瓶中，加10mL乙醇，摇匀，于45℃下减压浓缩至2~3mL，加5mL0.1M盐酸水溶液，混匀，待净化。样品提取流程图见下图1。

1.3.2 样品净化

SHIMSEN Styra MCX 150mg/6mL
5mL甲醇、5mL水活化，弃去流出液；待净化液上样，弃去流出液；5mL0.1M盐酸水溶液、5mL甲醇清洗，弃去流出液；5mL5%氨水甲醇洗脱，收集流出液；45℃下减压浓缩至近干，加乙腈定容至2mL，涡旋混匀，过0.22μmHPTFE滤膜，供HPLC分析。净化流程图见图2。

2. 实验结果

2.1 色谱图

2.2 豇豆中灭蝇胺HPLC检测添加回收结果

将豇豆空白样品进行0.5mg/kg浓度加标后，按照上述前处理方法处理后上机，平行3份样品考察回收率和RSD，具体结果如下：0.5mg/kg加标浓度的加标回收率为84.20-92.05%，RSD为4.49%。

3. 结论

本研究建立了豇豆中灭蝇胺的测定方法。参照NY 1725-2009前处理方法并进行优化，采用岛津的SHIMSEN Styra MCX产品对豇豆样品进行净化，ShimNex HE NH2色谱柱进行分离，岛津LC-20AD 检测分析。对空白样品加标后（添加浓度：0.5 mg/kg），按照上述前处理方法处理后上机，平行3份样品考察回收率和RSD，结果显示，加标回收率为84.20-92.05%，RSD为4.49%，回收率高，重现性好。该方法为豇豆中灭蝇胺的测定提供参考。