血塞通片中人参皂苷和三七皂苷的测定

摘要：本文建立了血塞通片含量测定的HPLC分析方法。参照2020版《中国药典》第一增补本中色谱条件，采用色谱柱ShimNex HE C18-AQ分析血塞通片含量测定，结果显示，参照物溶液和供试品溶液中，5个目标峰峰型良好，且与相邻杂质的分离度均大于1.5，且人参皂苷Rg1和人参皂苷Re的分离度大于1.8，理论塔板数按人参皂苷Rg1峰计算大于6000，满足《中国药典》要求。此方法可为血塞通片含量测定提供参考。
关键词：血塞通片 含量测定 ShimNex HE C18-AQ HPLC
 

1. 实验部分
1.1 实验仪器及耗材

Shimadzu LC-40D高效液相色谱仪；
色谱柱：ShimNex HE C18-AQ（5 μm，4.6×250 mm；P/N：380-01238-43；S/N：6FC06374）；
纯水机： PR-FP-0120α-MT1（ + 60L 水箱 + 取水器）；
SHIMSEN Disc HPTFE 针式过滤器（ P/N： 380-00341）；
LC/MS认证样品瓶LabTotal Vial（P/N：227-34001-01）；

SHIMSEN Pipet移液枪：SHIMSEN Pipet PMII-10（P/N：380-00751-02）；
SHIMSEN Pipet PMII-100（P/N：380-00751-04）；
SHIMSEN Pipet PMII-1000（P/N：380-00751-06）。

1.2 参照物溶液的制备

取三七总皂苷对照提取物适量，加70%甲醇溶解并稀释制成每1 mL含2.5mg的溶液，即得。

1.3 对照品溶液的制备

取人参皂苷Re对照品适量，精密称定，加70%甲醇制成每1mL含0.2mg的溶液，即得。

1.4 供试品溶液的制备

取本品20片，除去包衣，精密称定，研细，混匀，精密量取适量（约相当于含三七总皂苷25 mg），置具塞锥形瓶中，精密加入70%甲醇10mL，密塞，称定重量，超声处理（功率250 W，频率33kHz）10分钟，取出，放冷，再称定重量，用70%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

1.5 分析条件

色谱柱：ShimNex HE C18-AQ（5 μm，4.6×250 mm；P/N：380-01238-43；S/N：6FC06374）
柱温：25℃
检测波长：203nm
流速：1.3mL/min
进样量：10µL
流动相：A：水；B：乙腈
梯度程序如下：

2. 实验结果

按照上述色谱条件（1.5）进行采集，参照物溶液、对照品溶液和供试品溶液色谱图如下：
参照物溶液

对照品溶液

供试品溶液

重现性
参照物溶液重现性

对照品溶液重现性

供试品溶液重现性

3. 结论

本文建立了血塞通片含量测定的HPLC分析方法。参照2020版《中国药典》第一增补本中色谱条件，采用色谱柱ShimNex HE C18-AQ分析血塞通片含量测定，结果显示，参照物溶液和供试品溶液中，5个目标峰峰型良好，且与相邻杂质的分离度均大于1.5，且人参皂苷Rg1和人参皂苷Re的分离度大于1.8，理论塔板数按人参皂苷Rg1峰计算大于6000，满足《中国药典》要求。此方法可为血塞通片含量测定的检测提供参考。