苹果中乙氧基喹的测定

摘要：本文建立了苹果等食品中乙氧基喹的HPLC测定方法。参照国标GB5009.129-2023《食品中乙氧基喹的测定》中的色谱条件，采用色谱柱ShimNex CS C18分析苹果中的乙氧基喹，结果显示，乙氧基喹峰型对称，乙氧基喹与相邻杂质峰基线分离，满足国标要求。此方法可为食品中乙氧基喹的检测提供参考。
关键词：食品 乙氧基喹 ShimNex CS C18 HPLC 荧光检测器
 

1. 实验部分
1.1 实验仪器及耗材

Shimadzu LC-20AD高效液相色谱仪；
色谱柱：ShimNex CS C18（5 μm，4.6×150mm；P/N：380-01230-02）；
纯水机：PR-FP-0120α-MT1（+ 60L水箱+取水器）；
SHIMSEN Disc HPTFE针式过滤器（P/N：380-00341）；
LC-MS认证样品瓶LabTotal Vial（P/N：227-34001-01）；

SHIMSEN Pipet移液枪：SHIMSEN Pipet PMII-10（P/N：380-00751-02）；
SHIMSEN Pipet PMII-100（P/N：380-00751-04）；
SHIMSEN Pipet PMII-1000（P/N：380-00751-06）。

1.2 标准工作液的制备

取乙氧基喹标准品适量，精密称定，加含有抗坏血酸的乙腈（称取抗坏血酸0.1 g，溶于100 mL乙腈中，充分振摇，过滤，取滤液，临用现制），制成1mg/mL的标准储备液；吸取标准储备液1mL于100mL容量瓶中，用上述含有抗坏血酸的乙腈定容至刻度，摇匀后得到10.0 µg/mL的标准中间液；吸取标准中间液1mL于10mL容量瓶中，加上述含抗坏血酸的乙腈至刻度，混匀，得到1.00 µg/mL标准使用液体，临用现配；最后分别取标准使用液40.0 µL和1000 µL于10mL容量瓶中，再用上述含有抗坏血酸的乙腈定容至刻度，摇匀，得到4.00 ng/mL和100ng/mL的乙氧基喹标准工作液。

1.3 试样溶液的制备

取苹果可食部分500 g，加入抗坏血酸10 g，用组织捣碎机粉碎混匀加工成浆状，称取5 g（精确至0.01 g）于50 L离心管中，加入氢氧化钠溶液（0.1 mol/L）5 mL，涡旋混匀30 s后，加入10 mL正已烷，涡旋混匀30 s，振荡提取15 min后，以4000 r/min离心5 min，将正己烷层转移至25 mL容量瓶中，向残渣加入10mL正己烷，重复提取1次，以4000 r/min离心5 min，合并正已烷层于同一容量瓶中，加正已烷定容至刻度，混匀。吸取5.0 mL正已烷提取液，于30℃下氮气浓缩至干，迅速加入含抗坏血酸的乙腈溶液5.0 mL，涡旋混匀30 s，经0.45µm有机微孔滤膜过滤，制得试样待测液。

1.4 基质加标溶液的制备

取上述500µL试样待测液，加入2µL的1.00 µg/mL标准使用液，混匀，制得4.00ng/mL的基质加标待测液。

1.5 分析条件

色谱柱：ShimNex CS C18（5 μm，4.6×150mm；P/N：380-01230-02）
柱温：30℃
检测器：荧光检测器；激发波长：365nm；发射波长：435nm
流速：1.0 mL/min
进样量：10µL
流动相：A：水；B：乙腈；A：B=35：65

2. 实验结果

按照上述色谱条件（1.5）进行采集，标准工作液、试样溶液和基质加标溶液色谱图如下：
标准工作液（4.00ng/mL）

标准工作液（100.00ng/mL）

试样溶液

基质加标溶液

标准工作液、试样溶液、基质加标溶液对比图

重现性
标准品溶液重现性（4.00ng/mL）

标准品溶液重现性（100.00ng/mL）

基质加标溶液重现性（4.00ng/mL）

3. 结论

本文建立了苹果中乙氧基喹的HPLC测定方法。参照国标GB5009.129-2023《食品中乙氧基喹的测定》中的色谱条件，采用色谱柱ShimNex CS C18分析食品中的乙氧基喹，结果显示，乙氧基喹峰型对称，乙氧基喹与相邻杂质峰基线分离，满足国标GB5009.129-2023要求。此方法可为食品中乙氧基喹的检测提供参考。