ShimNex UP C18 分析三黄片中黄芩苷

摘要：本文建立了三黄片中黄芩苷的 HPLC 测定方法。参照 2020 版《中国药典》三黄片含量测定黄芩浸膏项下的色谱条件，采用色谱柱 ShimNex UP C18 分析三黄片中黄芩苷，并在黄芩苷出峰后，增加了纯有机相冲洗，结果显示，黄芩苷峰形对称，理论塔板数大于3000，黄芩苷与相邻杂质峰基线分离，满足《中国药典》 要求。此方法可为三黄片中黄芩苷的检测提供参考。
关键词：三黄片 黄芩苷 ShimNex UP C18 HPLC
 

1. 实验部分
1.1 实验仪器及耗材

Shimadzu LC-20AD 高效液相色谱仪；
色谱柱：ShimNex UP C18（5 μm，4.6×250 mm；P/N：380-01231-49；S/N：8FC03125）；
纯水机： PR-FP-0120α-MT1（ + 60L 水箱 + 取水器）；
SHIMSEN Disc HPTFE 针式过滤器（ P/N： 380-00341）；
LC/MS认证样品瓶LabTotal Vial（P/N：227-34001-01）；

Nichipet Air 移液枪：Nichipet Air 0.5-10 μL（P/N：00-NAR-10）；
Nichipet Air 10-100 μL（ P/N：00-NAR-100）；
Nichipet Air 100-1000 μL（P/N：00-NAR-1000）；
Nichipet Air 1000-10000 μL（P/N：00-NAR-100006）。

1.2 对照品溶液的制备

取黄芩苷对照品适量，精密称定，加 甲醇制成每 1 mL 含 25 μg 的溶液，即得。

1.3 供试品溶液的制备

取本品 10 片，除去包衣， 精密称定，研细，取约 0.1 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入 70%甲醇 25 mL，密塞，称定重量，超声处理（功率 160 W，频率 50 kHz）10 分钟，放冷，再称定重量，用 70%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液 1 mL，置 10 mL 量瓶中，加 70%甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

1.4 分析条件

色谱柱：ShimNex UP C18（5 μm，4.6×250 mm；P/N：380-01231-49；S/N：8FC03125）
柱温：30℃
检测波长：280 nm
流速：1.0 mL/min
进样量：10 µL
流动相：A：0.1%磷酸水溶液；B：甲醇
梯度程序如下：

2. 实验结果

按照上述色谱条件（1.4）进行采集，对照品溶液和供试品色谱图如下：
对照品溶液

供试品溶液

重现性
对照品溶液重现性

供试品溶液重现性

3. 结论

本文建立了三黄片中黄芩苷的 HPLC 测定方法。参照 2020 版《中国药典》含量测定黄芩浸膏项下的色谱条件，采用色谱柱 ShimNex UP C18 分析三黄片中黄芩苷，并在黄芩苷出峰后，增加了纯有机相冲洗，结果显示，黄芩苷峰形对称，理论塔板数大于3000，黄芩苷与相邻杂质峰基线分离，满足《中国药典》要求。此方法可为三黄片中黄芩苷的检测提供参考。