白头翁中白头翁皂苷B4的测定

摘要：本文建立了白头翁中白头翁皂苷 B4 的 HPLC 测定方法。参照 2020 版《中国药典》中色谱条件，采用色谱柱 ShimNex CS C18 分析白头翁中白头翁皂苷 B4，在白头翁皂苷 B4 出峰后，增加了纯有机相冲洗，结果显示，白头翁皂苷 B4 峰型对称，理论塔板数大于 3000，白头翁皂苷 B4 与相邻杂质峰基线分离，且重现性良好，满足《中国药典》要求。此方法可为白头翁中白头翁皂苷 B4 的检测提供参考。
关键词：白头翁   白头翁皂苷B4   ShimNex CS C18    HPLC
 

1. 实验部分
1.1 实验仪器及耗材

Shimadzu LC-40D 高效液相色谱仪；
色谱柱：ShimNex CS C18（5 μm，4.6×250 mm；P/N：380-01230-01；S/N：1FC07857）；
纯水机： PR-FP-0120α-MT1（ + 60L 水箱 + 取水器）；
SHIMSEN Disc HPTFE 针式过滤器（ P/N： 380-00341）；
LC/MS认证样品瓶LabTotal Vial（P/N：227-34001-01）；

Nichipet Air 移液枪：Nichipet Air 0.5-10 μL（P/N：00-NAR-10）；
Nichipet Air 10-100 μL（ P/N：00-NAR-100）；
Nichipet Air 100-1000 μL（P/N：00-NAR-1000）；
Nichipet Air 1000-10000 μL（P/N：00-NAR-100006）。

1.2 对照品溶液的制备

取白头翁皂苷 B4 对照品适量，精密称定，加甲醇制成每 1 mL 含 0.1 mg 的溶液，即得。

1.3 供试品溶液的制备

取本品粉末（过三号筛）0.2 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，加甲醇 10 mL，密塞，超声处理（功率 150 W，频率 40 kHz）25 分钟，放冷，滤过，滤液置 50 mL 量瓶中，用少量流动相洗涤容器及残渣，洗液并入同一量瓶中，加流动相至刻度，摇匀。取量瓶中溶液适量，用流动相稀释 5 倍，即得。

1.4 分析条件

色谱柱：ShimNex CS C18（5 μm，4.6×250 mm；P/N：380-01230-01；S/N：1FC07857）
柱温：25℃
检测波长：PDA 201 nm
流速：1.0 mL/min
进样量：20 µL （Co-injection：水，20 µL）
流动相：A：水；B：甲醇
梯度程序如下：

2. 实验结果

按照上述色谱条件（1.4）进行采集，对照品溶液和供试品溶液色谱图如下：

对照品溶液

供试品溶液

重现性
对照品溶液重现性

供试品溶液重现性

3. 结论

本文建立了白头翁中白头翁皂苷 B4 的 HPLC 测定方法。参照 2020 版《中国药典》中色谱条件，采用色谱柱 ShimNex CS C18 分析白头翁中白头翁皂苷 B4，Co-injection 进样，在白头翁皂苷 B4 出峰后，增加了纯有机相冲洗，结果显示，白头翁皂苷 B4 峰型对称，理论塔板数大于 3000，白头翁皂苷B4 与相邻杂质峰基线分离，且重现性良好，满足《中国药典》要求。此方法可为白头翁中白头翁皂苷B4 的检测提供参考。