食品中叶黄素的测定

摘要：本文建立了食品中叶黄素的 HPLC 测定方法。参照国标 GB 5009.248-2016 中色谱条件并对其优化，采用色谱柱 SHIMSEN VD C30 分析叶黄素，结果显示顺式叶黄素和反式叶黄素色谱峰峰型良好，且两者达到基线分离。此方法可为食品中叶黄素的分析提供参考。
关键词：叶黄素 SHIMSEN VD C30 HPLC
 

1. 实验部分
1.1 实验仪器及耗材

Shimadzu LC-40D XR 高效液相色谱仪；
色谱柱：SHIMSEN VD C30（3 μm，4.6×250 mm；P/N：380-01000-01）
纯水机： PR-FP-0120α-MT1（ + 60L 水箱 + 取水器）；
SHIMSEN Disc HPTFE 针式过滤器（ P/N： 380-00341）；
LC/MS认证样品瓶LabTotal Vial（P/N：227-34001-01）；

Nichipet Air 移液枪：Nichipet Air 0.5-10 μL（P/N：00-NAR-10）；
Nichipet Air 10-100 μL（ P/N：00-NAR-100）；
Nichipet Air 100-1000 μL（P/N：00-NAR-1000）；
Nichipet Air 1000-10000 μL（P/N：00-NAR-100006）。

1.2 标准溶液的制备

准确称取 5 mg（精确至 0.01 mg）叶黄素，用 0.1% BHT 乙醇溶液溶解并定容至 100 mL，得到 50.00 µg/mL 叶黄素标准贮备液。从贮备液中准确移取 1.00 mL 至 25 ml 棕色容量瓶中，用 0.1% BHT 乙醇溶液定容，得到浓度为 2.00 µg/mL 的叶黄素标准溶液。

1.3 分析条件

色谱柱：SHIMSEN VD C30（3 μm，4.6×250 mm；P/N：380-01000-01）
柱温：30℃
检测波长：445 nm
流速：0.8 mL/min
进样量：20 µL
流动相：A：甲醇/水（88+12，V/V，含 0.1% BHT）；B：甲基叔丁基醚（含 0.1% BHT）
梯度程序如下：

2. 实验结果

按照上述色谱条件（1.3）进行采集，叶黄素标准溶液色谱图如下：

叶黄素标准溶液

叶黄素标准溶液放大图

重现性
标准溶液

3. 结论

本文建立了食品中叶黄素的 HPLC 测定方法。参照国标 GB 5009.248-2016 中的色谱条件并对其优化，采用色谱柱 SHIMSEN VD C30 分析叶黄素，结果显示顺式叶黄素和反式叶黄素色谱峰峰型良好，且两者达到基线分离。此方法可为食品中叶黄素的分析提供参考。