柴胡分析

摘要：本文建立了柴胡的测定方法。结果表明，采用色谱柱Shim-pack VP-ODS (4.6×250 mm，5 μm)分析柴胡，柴胡皂苷a和柴胡皂苷d的分离度及其理论塔板数均满足《中国药典》要求。此方法可为柴胡的检测提供参考。
关键词：柴胡 Shim-pack VP-ODS HPLC
 

1. 实验部分
1.1 实验仪器及耗材

Shimadzu LC-20AD高效液相色谱仪；
色谱柱：Shim-pack VP-ODS (4.6×250 mm，5 μm；P/N：228-34937-92)；
SHIMSEN Arc Disc HPTFE针式过滤器（P/N：380-00341-05）；
LC/MS认证样品瓶LabTotal Vial（P/N：227-34001-01）；

SHIMSEN Pipet移液枪：SHIMSEN Pipet PMII-10（P/N：380-00751-02）；
SHIMSEN Pipet PMII-100（P/N：380-00751-04）；
SHIMSEN Pipet PMII-1000（P/N：380-00751-06）。

1.2 分析条件

色谱柱：Shim-pack VP-ODS (4.6×250 mm，5 μm)
流动相：乙腈-水
柱温：40 ℃
检测波长：210 nm
流速：1.0 mL/min
进样量：20 μL(标准品)、10 μL(供试品)
梯度洗脱程序

1.3 对照品溶液的制备

取柴胡皂苷a对照品、胡皂苷d对照品适量，精密称定，加甲醇制成每l mL含胡皂苷a 0.4 mg、胡皂苷d 0.5 mg的溶液，摇匀，即得。

1.4 供试品溶液的制备

取本品粉末（过四号筛）约0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，加入含5%浓氨试液的甲醇溶液25 mL，密塞，30℃水温超声处理（功率200W，频率40kHz）30分钟,滤过，用甲醇20 mL分2次洗涤容器及药渣，洗液与滤液合并，回收溶剂至干。残渣加甲醇溶解，转移至5 mL量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

2. 结果讨论

2.1 色谱图

按照上述色谱条件（1.2）进行采集，对照品溶液色谱图和样品色谱图如下：
柴胡皂苷a、柴胡皂苷d对照品溶液：

供试品溶液:

2.2 重现性

柴胡皂苷a的重复性：                                                                                            柴胡皂苷d的重复性：

3. 结论

本文建立了柴胡的测定方法。结果表明，采用色谱柱Shim-pack VP-ODS (4.6×250 mm，5 μm)分析柴胡，柴胡皂苷a和柴胡皂苷d的分离度及其理论塔板数均满足《中国药典》要求，重复性良好。此方法可为柴胡的检测提供参考。