防己药材的分析

摘要：本文建立了防己的HPLC测定方法。结果表明，采用色谱柱Shim-pack GISS C18 (4.6×250 mm，5 μm)分析防己，粉防己碱峰的理论塔板数为12557，防己诺林碱、粉防己碱与相邻杂质峰能达到基线分离，并且标准品溶液的峰面积RSD小于0.5% (n=3)，满足《中国药典》要求。此方法可为防己检测提供参考。
关键词：防己 Shim-pack GISS C18 HPLC
 

1. 实验部分
1.1 实验仪器及耗材

LC-2030 一体机；
色谱柱：Shim-pack GISS C18(4.6×250 mm，5 μm；P/N：227-30061-07)；
SHIMSEN Arc Disc HPTFE针式过滤器（P/N：380-00341-05）；
LC/MS认证样品瓶LabTotal Vial（P/N：227-34001-01）；

SHIMSEN Pipet移液枪：SHIMSEN Pipet PMII-10（P/N：380-00751-02）；
SHIMSEN Pipet PMII-100（P/N：380-00751-04）；
SHIMSEN Pipet PMII-1000（P/N：380-00751-06）。

1.2 分析条件

色谱柱：Shim-pack GISS (4.6×250 mm，5 μm)
流动相：乙腈-甲醇-水-冰醋酸（40:30:30:1)(每100ml含十二烷基磺酸钠0.41g)
柱温：30 ℃
检测波长：280 nm
流速：1.0 mL/min
进样量：10 μL

1.3 对照品溶液的制备

备取粉防己碱对照品、防己诺林碱对照品适量，精密称定，加甲醇分别制成每l mL含粉防己碱0.1 mg、防己诺林碱0.05 mg的混合溶液，即得。

1.4 供试品溶液的制备

取本品粉末（过三号筛）约0.5 g，精密称定，精密加入2%盐酸甲醇溶液25 mL，称定重量，加热回流30分钟，放冷，再称定重量，用2%盐酸甲醇溶液补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液5 mL，置10 mL量瓶中，加流动相至刻度，摇匀，即得。

2. 结果及讨论

2.1 色谱图

按照上述色谱条件（1.2）进行采集，对照品溶液色谱图和样品色谱图如下：
粉防己碱和防己诺林碱混标溶液：

供试品溶液:

2.2 重现性

配制一系列浓度的粉防己碱和防己诺林碱标准溶液。上述实验条件（1.2）进行采集。重现性结果如下所示。
防己诺林碱的重复性：                                                                                        粉防己碱的重复性：

3. 结论

参考《中国药典》中色谱条件，并对其条件进行优化，最终建立了防己的HPLC测定方法。结果表明，采用色谱柱Shim-pack GISS (4.6×250 mm，5 μm)分析防己，粉防己碱峰的理论塔板数为12557，防己诺林碱、粉防己碱与相邻杂质峰能达到基线分离，并且标准品溶液的峰面积RSD小于0.5% (n=3)，满足《中国药典》要求。此方法可为防己的检测提供参考。