覆盆子中山奈酚-3-O-芸香糖苷的测定

摘要：本文建立了覆盆子中山奈酚-3-O-芸香糖苷的HPLC测定方法。结果表明，采用色谱柱Shim-pack GISS C18 (4.6×250 mm，5 μm)分析山奈酚-3-O-芸香糖苷，山奈酚-3-O-芸香糖苷峰的理论塔板数为17812，山奈酚-3-O-芸香糖苷峰与相邻杂质峰能达到基线分离，满足《中国药典》要求。此方法可为覆盆子中山奈酚-3-O-芸香糖苷的检测提供参考。
关键词：覆盆子 山奈酚-3-O-芸香糖苷 Shim-pack GISS C18 HPLC
 

1. 实验部分
1.1 实验仪器及耗材

Shimadzu LC-20AD高效液相色谱仪；
色谱柱：Shim-pack GISS C18 (4.6×250 mm，5 μm；P/N：227-30061-07)；
SHIMSEN Arc Disc HPTFE针式过滤器（P/N：380-00341-05）；
LC/MS认证样品瓶LabTotal Vial（P/N：227-34001-01）；

SHIMSEN Pipet移液枪：SHIMSEN Pipet PMII-10（P/N：380-00751-02）；
SHIMSEN Pipet PMII-100（P/N：380-00751-04）；
SHIMSEN Pipet PMII-1000（P/N：380-00751-06）。

1.2 分析条件

色谱柱：Shim-pack GISS C18 (4.6×250 mm，5 μm)
流动相：乙腈-0.2%磷酸溶液（15:85）
柱温：30 ℃
检测波长：344 nm
流速：1.0 mL/min
进样量：10 μL

1.3 对照品溶液的制备

取山奈酚-3-O-芸香糖苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1 mL含80 μg的溶液，即得。

1.4 供试品溶液的制备

取本品粉末(过四号筛)约1 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入70%甲醇50 mL，称定重量，加热回流1小时，放冷，再称定重量，用70%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液25 ml，蒸干，残渣加水20ml使溶解，用石油醚振摇提取3次，每次20 ml，弃去石油醚液，再用水饱和正丁醇振摇提取3次，每次20 ml，合并正丁醇液，蒸干，残渣加适量甲醇溶解，转移至5 ml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

2. 结果及讨论

2.1 色谱图

按照上述色谱条件（1.2）进行采集，对照品溶液色谱图和样品色谱图如下：
山奈酚-3-O-芸香糖苷对照品溶液：

供试品溶液:

2.2 标准曲线、重现性

配制一系列浓度的山奈酚-3-O-芸香糖苷标准溶液。上述实验条件（1.2）进行采集。各组分标准曲线和重现性结果如下所示。
山奈酚-3-O-芸香糖苷标准曲线：                                                                       山奈酚-3-O-芸香糖苷的重复性：

3. 结论

参考《中国药典》中色谱条件，并对其条件进行优化，最终建立了覆盆子中山奈酚-3-O-芸香糖苷的HPLC测定方法。结果表明，采用色谱柱Shim-pack GISS C18 (4.6×250 mm，5 μm)分析山奈酚-3-O-芸香糖苷，山奈酚-3-O-芸香糖苷峰的理论塔板数为17812，山奈酚-3-O-芸香糖苷峰与相邻杂质峰能达到基线分离，满足《中国药典》要求。此方法可为覆盆子中山奈酚-3-O-芸香糖苷的检测提供参考。