关黄柏中盐酸巴马汀和盐酸小檗碱的测定

摘要：本文建立了关黄柏中盐酸巴马汀和盐酸小檗碱的HPLC测定方法。结果表明，采用色谱柱Shim-Pack GIS C18 (4.6×250 mm，5 μm )分析盐酸巴马汀和盐酸小檗碱，盐酸小檗碱峰的理论塔板数为11038，盐酸小檗碱和盐酸巴马汀色谱峰能获得合适的保留时间以及与相邻峰良好的分离度，并且标准品溶液的峰面积RSD小于0.5% (n=3)，满足《中国药典》要求。此方法可为关黄柏中盐酸巴马汀和盐酸小檗碱的检测提供参考。
关键词：关黄柏 盐酸巴马汀 盐酸小檗碱 Shim-Pack GIS C18 HPLC
 

1. 实验部分
1.1 实验仪器及耗材

LC-2030一体机；
色谱柱：Shim-Pack GIS C18 (4.6×250 mm，5 μm；P/N 227-30106-08)；
SHIMSEN Arc Disc HPTFE针式过滤器（P/N：380-00341-05）；
LC/MS认证样品瓶LabTotal Vial（P/N：227-34001-01）；

SHIMSEN Pipet移液枪：SHIMSEN Pipet PMII-10（P/N：380-00751-02）；
SHIMSEN Pipet PMII-100（P/N：380-00751-04）；
SHIMSEN Pipet PMII-1000（P/N：380-00751-06）。

1.2 分析条件

色谱柱：Shim-Pack GIS C18 (4.6×250 mm，5 μm )
流动相：药典条件
柱温：25 ℃
检测波长：345 nm
流速：1.0 mL/min
进样量：10 μL

1.3 对照品溶液的制备

取盐酸小檗碱对照品、盐酸巴马汀对照品适量，精密称定，加60%乙醇制成每l mL各含50 μg的混合溶液，即得。

1.4 供试品溶液的制备

取本品粉末（过三号筛）约0.2 g，精密称定，，置50ml量瓶中，加人60%乙醇40ml，超声处理（功率250 W，频率40 kHz)45分钟，放冷，加60%乙醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

2. 结果及讨论

2.1 色谱图

按照上述色谱条件（1.2）进行采集，对照品溶液色谱图和样品色谱图如下：
盐酸巴马汀和盐酸小檗碱混标对照品溶液：

供试品溶液:

2.2 标准曲线、重现性

配制一系列浓度的盐酸巴马汀和盐酸小檗碱标准溶液。上述实验条件（1.2）进行采集。各组分标准曲线和重现性结果如下所示。
（1）盐酸巴马汀标准曲线：                                                                                   盐酸巴马汀的重复性：

（2）盐酸小檗碱标准曲线：                                                                                   盐酸小檗碱的重复性：

3. 结论

参考《中国药典》中色谱条件，并对其条件进行优化，最终建立了关黄柏中盐酸巴马汀和盐酸小檗碱的HPLC测定方法。结果表明，采用色谱柱Shim-Pack GIS C18 (4.6×250 mm，5 μm )分析盐酸巴马汀和盐酸小檗碱，盐酸小檗碱峰的理论塔板数为11038，盐酸小檗碱和盐酸巴马汀色谱峰能获得合适的保留时间以及与相邻峰良好的分离度，并且标准品溶液的峰面积RSD小于0.5% (n=3)，满足《中国药典》要求。此方法可为关黄柏中盐酸巴马汀和盐酸小檗碱的检测提供参考。