黄连中盐酸小檗碱的测定
2020年6月15日
摘要：本文建立了黄连中盐酸小檗碱的HPLC测定方法。结果表明，采用色谱柱Shim-pack GISS C18 (4.6×250 mm，5 μm )分析盐酸小檗碱，盐酸小檗碱峰的理论塔板数为19897，盐酸小檗碱峰与相邻杂质峰能达到基线分离，并且标准品溶液的峰面积RSD小于0.5% (n=3)，满足《中国药典》要求。此方法可为黄连中盐酸小檗碱的检测提供参考。
关键词：黄连 盐酸小檗碱 Shim-pack GISS C18 HPLC
1. 实验部分
1.1 实验仪器及耗材
Shimadzu LC-20AD高效液相色谱仪；
色谱柱Shim-pack GISS C18 (4.6×250 mm，5 μm；P/N 227-30061-07)；
SHIMSEN Arc Disc HPTFE针式过滤器（P/N：380-00341-05）；
LC/MS认证样品瓶LabTotal Vial（P/N：227-34001-01）；
SHIMSEN Pipet移液枪：SHIMSEN Pipet PMII-10（P/N：380-00751-02）；
SHIMSEN Pipet PMII-100（P/N：380-00751-04）；
SHIMSEN Pipet PMII-1000（P/N：380-00751-06）。
1.2 分析条件
色谱柱：Shim-pack GISS C18 (4.6×250 mm，5 μm )
流动相：乙腈-0.05 mol/L磷酸二氢钾溶液（45:55)(每100 mL中加十二烷基硫酸钠0.4 g，再以磷酸调节pH值为4.0)
柱温：25 ℃
检测波长：345 nm
流速：1.0 mL/min
进样量：10 μL
1.3 对照品溶液的制备
取盐酸小檗碱对照品适量，精密称定，加甲醇制成每l mL含90.5 μg的溶液，即得。
1.4 供试品溶液的制备
取本品粉末（过二号筛）约0.2 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇-盐酸（100：1)的混合溶液50 mL，密塞，称定重量，超声处理（功率250W，频率40kHz)30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液2 mL，置10 mL量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
2. 结果及讨论
2.1 色谱图
按照上述色谱条件（1.2）进行采集，对照品溶液色谱图和样品色谱图如下：
小檗碱对照品溶液：
黄连供试品溶液：
2.2 标准曲线、重现性
配制一系列浓度的阿魏酸标准溶液。上述实验条件（1.2）进行采集。各组分标准曲线和重现性结果如下所示。
小檗碱标准曲线： 小檗碱的重复性：
3. 结论
参考《中国药典》中色谱条件，并对其条件进行优化，最终建立了黄连中盐酸小檗碱的HPLC测定方法。采用色谱柱Shim-pack GISS C18 (4.6×250 mm，5 μm )分析盐酸小檗碱，盐酸小檗碱峰的理论塔板数为19897，盐酸小檗碱峰与相邻杂质峰能达到基线分离，并且标准品溶液的峰面积RSD小于0.5% (n=3)，满足《中国药典》要求。此方法可为黄连中盐酸小檗碱的检测提供参考。