款冬花中款冬酮的测定

摘要：本文建立了款冬花中款冬酮的HPLC测定方法。结果表明，采用色谱柱Shim-Pack GIS C18 (4.6×250 mm，5 μm )分析款冬酮，款冬酮峰的理论塔板数为13579，款冬酮峰与相邻杂质峰能达到基线分离，并且标准品溶液的峰面积RSD小于0.5% (n=3)，满足《中国药典》要求。此方法可为款冬花中款冬酮的检测提供参考。
关键词：款冬花 款冬酮 Shim-Pack GIS C18 HPLC
 

1. 实验部分
1.1 实验仪器及耗材

Shimadzu LC-20AD高效液相色谱仪；
色谱柱Shim-Pack GIS C18 (4.6×250 mm，5 μm；P/N 227-30106-08)；
SHIMSEN Arc Disc HPTFE针式过滤器（P/N：380-00341-05）；
LC/MS认证样品瓶LabTotal Vial（P/N：227-34001-01）；

SHIMSEN Pipet移液枪：SHIMSEN Pipet PMII-10（P/N：380-00751-02）；
SHIMSEN Pipet PMII-100（P/N：380-00751-04）；
SHIMSEN Pipet PMII-1000（P/N：380-00751-06）。

1.2 分析条件

色谱柱：Shim-Pack GIS C18 (4.6×250 mm，5 μm )
流动相：甲醇-水（75:25）
柱温：40 ℃
检测波长：220 nm
流速：1.0 mL/min
进样量：10 μL

1.3 对照品溶液的制备

取款冬酮对照品适量，精密称定，加流动相制成每1 mL含50 μg的溶液，即得。

1.4 供试品溶液的制备

取本品粉末(过四号筛)约1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入乙醇20 mL，称定重量，超声处理(功率250W，频率40kHZ)1小时，放冷，再称定重量，用乙醇补足减失的重量，摇匀，取续滤液，即得。

2. 结果及讨论

2.1 色谱图

按照上述色谱条件（1.2）进行采集，对照品溶液色谱图和样品色谱图如下：
款冬酮对照品溶液：

黄连供试品溶液：

2.2 标准曲线、重现性

配制一系列浓度的款冬酮标准溶液。上述实验条件（1.2）进行采集。各组分标准曲线和重现性结果如下所示。
款冬酮标准曲线：                                                                                                      款冬酮的重复性：

3. 结论

参考《中国药典》中色谱条件，并对其条件进行优化，最终建立了款冬花中款冬酮的HPLC测定方法。采用色谱柱Shim-Pack GIS C18 (4.6×250 mm，5 μm )分析款冬酮，款冬酮峰的理论塔板数为13579，款冬酮峰与相邻杂质峰能达到基线分离，并且标准品溶液的峰面积RSD小于0.5% (n=3)，满足《中国药典》要求。此方法可为款冬花中款冬酮的检测提供参考。