梅花药材的分析

摘要：本文建立了梅花中绿原酸、金丝桃苷和异槲皮苷的HPLC测定方法。结果表明，采用色谱柱Shim-pack VP-ODS (4.6×250 mm，5 μm )分析绿原酸、金丝桃苷和异槲皮苷，金丝桃苷峰的理论塔板数为39521，绿原酸、金丝桃苷和异槲皮苷峰与相邻杂质峰能达到极限分离，并且标准品溶液的峰面积RSD小于0.5% (n=3)，满足《中国药典》要求。此方法可为梅花中绿原酸、金丝桃苷和异槲皮苷的检测提供参考。
关键词：梅花 绿原酸 金丝桃苷 异槲皮苷 Shim-pack VP-ODS HPLC
 

1. 实验部分
1.1 实验仪器及耗材

LC-2030一体机；
色谱柱Shim-pack VP-ODS (4.6×250 mm，5 μm；P/N 228-34937-92)；
SHIMSEN Arc Disc HPTFE针式过滤器（P/N：380-00341-05）；
LC/MS认证样品瓶LabTotal Vial（P/N：227-34001-01）；

SHIMSEN Pipet移液枪：SHIMSEN Pipet PMII-10（P/N：380-00751-02）；
SHIMSEN Pipet PMII-100（P/N：380-00751-04）；
SHIMSEN Pipet PMII-1000（P/N：380-00751-06）。

1.2 分析条件

色谱柱：Shim-pack VP-ODS (4.6×250 mm，5 μm )
柱温： 25-30℃
检测波长：355 nm
流速：1.0 mL/min
进样量：10μL
流动相：0.1%甲酸的乙腈（A）-0.1%甲酸溶液(B)

1.3 对照品溶液的制备

取绿原酸对照品、金丝桃苷对照品和异槲皮苷对照品适量，精密称定，加50%甲醇制成每l mL含绿原酸0.2 mg、金丝桃苷15μg、异槲皮苷15 μg的混合溶液，即得。

1.4 供试品溶液的制备

取本品粉末（过四号筛）约0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入50%甲醇溶液50mL，密塞，称定重量，超声处理(功率250W，频率40kHz)45分钟，放冷，再称定重量，用50%甲醇溶液补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

2. 结果及讨论

2.1 色谱图

按照上述色谱条件（1.2）进行采集，对照品溶液色谱图和样品色谱图如下：
梅花脂素对照品溶液：

供试品溶液：

2.2 标准曲线、重现性

配制一系列浓度的标准溶液。上述实验条件（1.2）进行采集。各组分标准曲线和重现性结果如下所示。
绿原酸标准曲线：                                                                                       绿原酸的重复性：

金丝桃苷标准曲线：                                                                                       金丝桃苷的重复性：

异槲皮苷标准曲线：                                                                                       异槲皮苷的重复性：

3. 结论

参考《中国药典》中色谱条件，并对其条件进行优化，建立了梅花中绿原酸、金丝桃苷和异槲皮苷的HPLC测定方法。结果表明，采用色谱柱Shim-pack VP-ODS (4.6×250 mm，5 μm )分析绿原酸、金丝桃苷和异槲皮苷，金丝桃苷峰的理论塔板数为39521，绿原酸、金丝桃苷和异槲皮苷峰与相邻杂质峰能达到极限分离，并且标准品溶液的峰面积RSD小于0.5% (n=3)，满足《中国药典》要求。此方法可为梅花中绿原酸、金丝桃苷和异槲皮苷的检测提供参考。