连翘中连翘苷的测定

摘要：本文建立了连翘中连翘苷的HPLC测定方法。结果表明，按照2020版《中国药典》中色谱条件，采用色谱柱Shim-pack GIS C18、Shim-pack Scepter C18-120分析连翘中连翘苷，连翘苷的峰形对称，理论塔板数大于3000，且与相邻杂质峰能达到基线分离，满足《中国药典》要求。此方法可为连翘中连翘苷的检测提供参考。
关键词：连翘 连翘苷 Shim-pack GIS C18 Shim-pack Scepter C18-120 HPLC
 

1. 实验部分
1.1 实验仪器及耗材

Shimadzu LC-20AD高效液相色谱仪；
色谱柱：Shim-pack Scepter C18-120（5 μm，4.6×250 mm；P/N：227-31020-06；S/N：114CA90137）；
             Shim-pack GIS C18（5 μm，4.6×250 mm；P/N：227-30106-08；S/N：19K07425）；
SHIMSEN Arc Disc HPTFE针式过滤器（P/N：380-00341-05）；
LC/MS认证样品瓶LabTotal Vial（P/N：227-34001-01）；

SHIMSEN Pipet移液枪：SHIMSEN Pipet PMII-10（P/N：380-00751-02）；
 SHIMSEN Pipet PMII-100（P/N：380-00751-04）；
 SHIMSEN Pipet PMII-1000（P/N：380-00751-06）。

1.2 对照品溶液的制备

取连翘苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1 mL含0.2 mg的溶液，即得。

1.3 供试品溶液的制备

取本品粉末（过五号筛）约2 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25 mL，称定重量，超声处理（功率250 W，频率40 kHz）25分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液10 ml，置25 mL量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

1.4 分析条件及实验结果

1.4.1 分析条件

色谱柱：Shim-pack Scepter C18-120（5 μm，4.6×250 mm；P/N：227-31020-06；S/N：114CA90137）
柱温：40℃
检测波长：277 nm
流速：1.0 mL/min
进样量：10 µL
流动相： 乙腈：水=25：75

实验结果

按照上述色谱条件（1.4.1）进行采集，对照品溶液和供试品溶液色谱图如下：
对照品溶液:

供试品溶液:

重现性
对照品溶液重现性

供试品溶液重现性

1.4.2 分析条件

色谱柱：Shim-pack GIS C18（5 μm，4.6×250 mm；P/N：227-30106-08；S/N：19K07425）
柱温：30℃
检测波长：277 nm
流速：1.0 mL/min
进样量：10 µL
流动相： 乙腈：水=25：75

实验结果

按照上述色谱条件（1.4.2）进行采集，对照品溶液和供试品溶液色谱图如下：
对照品溶液:

供试品溶液:

重现性
对照品溶液重现性

供试品溶液重现性

3. 结论

按照2020版《中国药典》中色谱条件，建立了连翘中连翘苷的HPLC测定方法。结果表明，按照2020版《中国药典》中色谱条件，采用色谱柱Shim-pack GIS C18、Shim-pack Scepter C18-120分析连翘中连翘苷，连翘苷的峰形对称，理论塔板数大于3000，且与相邻杂质峰能达到基线分离，满足《中国药典》要求。此方法可为连翘中连翘苷的检测提供参考。