蟾酥含量测定及特征图谱

摘要：本文建立了蟾酥特征图谱及含量测定的HPLC方法。参照2020版《中国药典》蟾酥含量测定项下的色谱条件，采用色谱柱Shim-pack VP-ODS（4.6×250mm，5μm），对蟾酥对照药材进行分析，结果显示以华蟾酥毒基为参照峰，蟾毒灵和脂蟾毒配基的相对保留时间均在规定值的±5%范围内；特征图谱应出现的5个特征峰均有呈现，且峰形和重现性良好；且华蟾基毒素与相邻杂质能达到基线分离，满足药典要求。此方法可为蟾酥含量测定及特征图谱的测定提供参考。
关键词：蟾酥 含量测定 特征图谱 Shim-pack VP-ODS HPLC
 

1. 实验部分
1.1 实验仪器及耗材

Shimadzu LC-20AD高效液相色谱仪；
色谱柱：Shim-pack VP-ODS (4.6×250 mm，5 μm；P/N：228-34937-92；S/N：9052614)；
SHIMSEN Arc Disc HPTFE针式过滤器（P/N：380-00341-05）；
LC/MS认证样品瓶LabTotal Vial（P/N：227-34001-01）；

SHIMSEN Pipet移液枪：SHIMSEN Pipet PMII-10（P/N：380-00751-02）；
SHIMSEN Pipet PMII-100（P/N：380-00751-04）；
SHIMSEN Pipet PMII-1000（P/N：380-00751-06）。

1.2 参照物溶液的制备

取蟾酥对照药材25 mg，精密称定，置于具塞锥形瓶中，精密加入甲醇20 mL，称定重量，加热回流1小时，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

1.3 分析条件

色谱柱：Shim-pack VP-ODS (4.6×250 mm，5 μm；P/N：227-34937-92；S/N：9052614)
柱温：30℃
检测波长：296 nm
流速：0.6 mL/min
进样量：10 μL
流动相：A：0.3%乙酸溶液 B：乙腈

2. 结果

按照上述色谱条件（1.3）进行采集，色谱图如下：
参照物溶液：

重现性

3. 结论

本文建立了蟾酥特征图谱及含量测定的HPLC方法。参照2020版《中国药典》蟾酥含量测定项下的色谱条件，采用色谱柱Shim-pack VP-ODS（4.6×250mm，5μm），对蟾酥对照药材进行分析，结果显示以华蟾酥毒基为参照峰，蟾毒灵和脂蟾毒配基的相对保留时间均在规定值的±5%范围内；特征图谱应出现的5个特征峰均有呈现，且峰形和重现性良好。此方法可为蟾酥含量测定及特征图谱的测定提供参考。