冬虫夏草药材的分析

摘要：本文建立了冬虫夏草的HPLC测定方法。结果表明，采用色谱柱Shim-Pack GIS C18 (4.6×250 mm，5 μm )分析冬虫夏草，腺苷峰的理论塔板数为4771，腺苷峰与相邻杂质峰能达到极限分离，并且1标准品溶液的峰面积RSD小于0.5% (n=3)，满足《中国药典》要求。此方法可为冬虫夏草的检测提供参考。
关键词：冬虫夏草 Shim-Pack GIS C18 HPLC
 

1. 实验部分
1.1 实验仪器及耗材

Shimadzu LC-20AD高效液相色谱仪；
色谱柱Shim-Pack GIS C18 (4.6×250 mm，5 μm；P/N 227-30106-08)；
SHIMSEN Arc Disc HPTFE针式过滤器（P/N：380-00341-05）；
LC/MS认证样品瓶LabTotal Vial（P/N：227-34001-01）；

SHIMSEN Pipet移液枪：SHIMSEN Pipet PMII-10（P/N：380-00751-02）；
SHIMSEN Pipet PMII-100（P/N：380-00751-04）；
SHIMSEN Pipet PMII-1000（P/N：380-00751-06）。

1.2 分析条件

色谱柱：Shim-Pack GIS C18 (4.6×250 mm，5 μm )
流动相：磷酸盐缓冲液(pH 6.5) -甲醇（90:10）
柱温：25℃
检测波长：260 nm
流速：1.0 mL/min
进样量：10 μL

1.3 对照品溶液的制备

取腺苷对照品适量，精密称定，加90%甲醇制成每l mL含20μg溶液，即得。

1.4 供试品溶液的制备

取本品粉末（过三号筛）约0.5 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入90%甲醇10 mL密塞，摇匀，称定靈量，加热回流30分钟，放冷，再称定重量，用90%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

2. 结果及讨论

2.1 色谱图

按照上述色谱条件（1.2）进行采集，对照品溶液色谱图和样品色谱图如下：
腺苷对照品溶液：

供试品溶液：

2.2 标准曲线、重现性

配制一系列浓度的腺苷标准溶液。上述实验条件（1.2）进行采集。各组分标准曲线和重现性结果如下所示。
腺苷标准曲线：

腺苷的重复性：

3. 结论

参考《中国药典》中色谱条件，并对其条件进行优化，最终建立了冬虫夏草的HPLC测定方法。结果表明，采用色谱柱Shim-Pack GIS C18 (4.6×250 mm，5 μm )分析冬虫夏草，腺苷峰的理论塔板数为4771，腺苷峰与相邻杂质峰能达到极限分离，并且标准品溶液的峰面积RSD小于0.5% (n=3)，满足《中国药典》要求。此方法可为冬虫夏草的检测提供参考。