外用重组人表皮生长因子的测定

摘要：本文参照《中国药典》中分析条件，建立了外用重组人表皮生长因子的 HPLC 纯度测定方法。结果表明，采用色谱柱 Shim-pack GIST C18-AQ (4.6×250 mm，5 μm )分析外用重组人表皮生长因子，峰形对称，理论塔板数为 30362，远大于药典要求的 500，此方法可为外用重组人表皮生长因子的纯度检测提供参考。
关键词：外用重组人表皮生长因子 Shim-pack GIST C18-AQ HPLC
 

1. 实验部分
1.1 实验仪器及耗材

Shimadzu LC-20AD 高效液相色谱仪；
色谱柱：Shim-pack GIST C18-AQ（5 μm，4.6×250 mm；P/N：227-30742-08 ）；
SHIMSEN Arc Disc HPTFE针式过滤器（P/N：380-00341-05）；
GC-MS认证样品瓶LabTotal Vial（P/N：227-34001-01）；

SHIMSEN Pipet移液枪：SHIMSEN Pipet PMII-10（P/N：380-00751-02）；
SHIMSEN Pipet PMII-100（P/N：380-00751-04）；
SHIMSEN Pipet PMII-1000（P/N：380-00751-06）。

1.2 供试品溶液

客户提供（500μg/mL；样品溶剂为 PBS 溶液）

1.3 HPLC 条件

色谱柱：Shim-pack GIST C18-AQ（5 μm，4.6×250 mm；P/N：227-30742-08 ）；
柱温：25℃
流动相： A：0.1%三氟乙酸水溶液 B：0.1%三氟乙酸乙腈溶液
检测波长：280 nm
流速：1.0 mL/min
进样量：20 µL
梯度洗脱程序如下：

2. 结果及讨论

按照上述色谱条件（1.3）进行采集，供试品溶液色谱图如下：

重现性

3. 结论

本文参照《中国药典》中分析条件，建立了外用重组人表皮生长因子的 HPLC 纯度测定方法。结果表明，采用色谱柱 Shim-pack GIST C18-AQ (4.6×250 mm，5 μm )分析外用重组人表皮生长因子，峰形对称，理论塔板数为30362，远大于药典要求的500，此方法可为外用重组人表皮生长因子的纯度检测提供参考。