注射用重组人白介素-11纯度的测定(分子排阻法)
2021年10月27日
摘要:本文参照参照《中国药典》中分析条件,建立了注射用重组人白介素-11 纯度(分子排阻法)的 HPLC测定方法。结果表明,采用色谱柱 ShimSen SEC-H 300 (7.8×300mm,3μm)分析注射用重组人白介素11,理论塔板数为 26796,远大于药典要求的 1500,且主峰与二聚体的分离度良好,此方法可为注射用重组人白介素-11 纯度(分子排阻法)的检测提供参考。
关键词:注射用重组人白介素-11 分子排阻法 ShimSen SEC-H 300 HPLC
1. 实验部分
1.1 实验仪器及耗材
Shimadzu Nexera Bio 液相色谱仪;
色谱柱:ShimSen SEC-H 300 (3 μm,7.8×300 mm;P/N:380-01005-04 );
SHIMSEN Arc Disc HPTFE针式过滤器(P/N:380-00341-05);
GC-MS认证样品瓶LabTotal Vial(P/N:227-34001-01);
SHIMSEN Pipet移液枪:SHIMSEN Pipet PMII-10(P/N:380-00751-02);
SHIMSEN Pipet PMII-100(P/N:380-00751-04);
SHIMSEN Pipet PMII-1000(P/N:380-00751-06)。
1.2 供试品溶液
客户提供(5mg/mL)
1.3 HPLC 条件
色谱柱:ShimSen SEC-H 300 (3 μm,7.8×300 mm;P/N:380-01005-04 );
柱温:30℃
检测波长:280 nm
流速:0.5 mL/min
进样量:4 µL
流动相:0.1 mol/L 磷酸盐溶液-0.1mol/L 氯化钠溶液,pH 7.0 (称取 13.6 g 磷酸二氢钾,5.81g 氯化钠,加水 900 mL 溶解,用氢氧化钠调 pH 至 7.0,加水定容至 1000mL)
2. 结果及讨论
按照上述色谱条件(1.3)进行采集,供试品溶液色谱图如下:
重现性 (平行进样 3 针)
3. 结论
本文参照参照《中国药典》中分析条件,建立了注射用重组人白介素-11纯度(分子排阻法)的HPLC测定方法。结果表明,采用色谱柱 ShimSen SEC-H 300 (7.8×300mm,3μm)分析注射用重组人白介素-11,理论塔板数为26796,远大于药典要求的1500,且主峰与二聚体的分离度良好,此方法可为注射用重组人白介素-11 纯度(分子排阻法)的检测提供参考。