食品中维生素A、D、E的测定

2021年11月04日

摘要：本文建立了食品中维生素A、D、E测定的HPLC方法。采用色谱柱Shim-pack Velox Biphenyl，可实现维生素A、D、E在一根色谱柱的分离，维生素A、D、E色谱峰峰形对称，分离度和重现性良好，满足检测要求。此方法可为食品中维生素A、D、E的测定提供参考。
关键词：维生素A、D、E 食品 Shim-pack Velox Biphenyl HPLC

1. 实验部分
1.1 实验仪器及耗材

Shimadzu LC-20AD高效液相色谱仪搭配PDA及荧光检测器（RF-20A）；
色谱柱：Shim-pack Velox Biphenyl（2.7 μm，4.6×150 mm；P/N：227-32017-04；S/N：190310E）；
SHIMSEN Arc Disc HPTFE针式过滤器（P/N：380-00341-05）；
LC/MS认证样品瓶LabTotal Vial（P/N：227-34001-01）；

SHIMSEN Pipet移液枪：SHIMSEN Pipet PMII-10（P/N：380-00751-02）；
SHIMSEN Pipet PMII-100（P/N：380-00751-04）；
SHIMSEN Pipet PMII-1000（P/N：380-00751-06）。

1.2 对照品溶液的制备

取维生素A（视黄醇）、维生素D（维生素D2、维生素D3）、维生素E（α-生育酚、β-生育酚、γ-生育酚、δ-生育酚）各对照品适量，加甲醇稀释制成每1 mL含各组分10 μg的溶液。

1.3 分析条件

色谱条件一（维生素A、E同时分析）：

色谱柱：Shim-pack Velox Biphenyl（2.7 μm，4.6×150 mm；P/N：227-32017-04）
流速：0.8 mL/min
进样量：10 µL
柱温：35℃
荧光检测器：（1）激发波长328，发射波长440 （2）激发波长294，发射波长328
流动相：水：甲醇= 10：90

色谱条件二（维生素A、D、E同时分析）：

Shim-pack Velox Biphenyl（2.7 μm，4.6×150 mm；P/N：227-32017-04）
流速：0.8 mL/min
进样量：10 µL
柱温：35℃
PDA检测器：264 nm
荧光检测器：（1）激发波长328，发射波长440 （2）激发波长294，发射波长328
流动相：水：甲醇= 15：85

2. 实验结果

按照上述色谱条件（1.3）中色谱条件一进行采集，维生素A、E混合对照品溶液色谱图如下：
维生素A对照品溶液（激发波长328，发射波长440）
Shim-pack Velox Biphenyl
重现性