依托泊苷有关物质分析

摘要：本文建立了依托泊苷有关物质分析的HPLC测定方法。参照《中国药典》中色谱分析条件，采用色谱柱Shim-pack VP-Phenyl和Shim-pack Scepter Phenyl-120，对依托泊苷有关物质系统适用性溶液、供试品溶液、对照溶液、灵敏度溶液进行分析，系统适用性溶液色谱图中，依托泊苷峰的保留时间约为26.593和26.307分钟，依托泊苷峰与对羟基苯甲酸丙酯峰的分离度符合要求，满足《中国药典》需求，此方法可为依托泊苷有关物质分析提供参考。
关键词：依托泊苷、有关物质、Shim-pack VP-Phenyl、Shim-pack Scepter Phenyl-120、HPLC
 

1. 实验部分
1.1 实验仪器及耗材

Shimadzu LC-20AD XR高效液相色谱仪；
色谱柱：Shim-pack VP-Phenyl（4.6×250mm，5μm；P/N：228-59928-92；S/N：0032032）；
    Shim-pack Scepter Phenyl-120（4.6×250 mm，5 μm；P/N：227-31071-06；S/N：122DB00028）；
SHIMSEN Arc Disc HPTFE针式过滤器（P/N：380-00341-05）；
LC/MS认证样品瓶LabTotal Vial（P/N：227-34001-01）；

SHIMSEN Pipet移液枪：SHIMSEN Pipet PMII-10（P/N：380-00751-02）；
SHIMSEN Pipet PMII-100（P/N：380-00751-04）；
SHIMSEN Pipet PMII-1000（P/N：380-00751-06）。

1.2 溶液的制备

1.2.1 混合溶剂

乙腈-醋酸盐缓冲液（取醋酸钠5.44g，加水溶解并稀释至2000mL，用冰醋酸调节pH值至4.0）（30∶70）

1.2.2 系统适用性溶液

取对羟基苯甲酸丙酯适量，加混合溶剂溶解并稀释制成每1mL中约含0.2mg的溶液，取1mL，置200mL量瓶中，再精密加入供试品溶液1mL，用混合溶剂稀释至刻度，摇匀。

1.2.3 供试品溶液

取本品，加混合溶剂溶解并稀释制成每1mL中约含2mg的溶液。

1.2.4 对照溶液

供试品溶液用甲醇稀释100倍。

1.2.5 灵敏度溶液

供试品溶液稀释2000倍。

1.3 分析条件

柱温：25℃
柱流速：1.5mL/min
进样量：20µL
流动相：A：乙腈-醋酸盐缓冲液（20∶80）；B：乙腈-醋酸盐缓冲液（60∶40）。
梯度程序如下：

实验结果

按照上述色谱条件（1.3）进行采集，色谱图如下：

1.3.1 色谱柱：Shim-pack VP-Phenyl（4.6×250mm，5μm；P/N：228-59928-92）；

系统适用性溶液

供试品溶液

对照溶液

灵敏度溶液

1.3.2 色谱柱：Shim-pack Scepter Phenyl-120（4.6×250mm，5μm；P/N：227-31071-06）；

系统适用性溶液

供试品溶液

对照溶液

灵敏度溶液

3. 结论

本文建立了依托泊苷有关物质分析的HPLC测定方法。参照《中国药典》中色谱分析条件，采用色谱柱Shim-pack VP-Phenyl和Shim-pack Scepter Phenyl-120，对依托泊苷有关物质系统适用性溶液、供试品溶液、对照溶液、灵敏度溶液进行分析，系统适用性溶液色谱图中，依托泊苷峰的保留时间约为26.593和26.307分钟，依托泊苷峰与对羟基苯甲酸丙酯峰的分离度符合要求，满足《中国药典》需求，此方法可为依托泊苷有关物质分析提供参考。