阿德福韦酯有关物质分析
2021年11月04日
摘要：本文建立了阿德福韦酯有关物质分析的HPLC和UPLC测定方法。参照2020版《中国药典》中色谱分析条件，采用色谱柱 Shim-pack Scepter C18-120 和 Shim-pack VP-ODS，对阿德福韦酯有关物质的系统适用性溶液、供试品溶液、对照溶液和灵敏度溶液进行分析，结果表明，HPLC方法和UPLC方法的系统适用性溶液色谱图中，主成分阿德福韦酯峰与阿德福韦单酯峰间的分离度大于1.5，阿德福韦单酯峰与阿德福韦酯峰间的分离度均大于9，满足《中国药典》要求。此方法可为阿德福韦酯有关物质分析提供参考。
关键词：阿德福韦酯、Shim-pack Scepter C18-120、Shim-pack VP-ODS、HPLC、UPLC
1. 实验部分
1.1 实验仪器及耗材
Shimadzu LC-20AD高效液相色谱仪；
Shimadzu LC-40B X3超高效液相色谱仪；
色谱柱：Shim-pack Scepter C18-120（5μm，4.6×150mm；P/N：227-31020-05；S/N：115EB00053）；
Shim-pack VP-ODS（5μm，4.6×150mm；P/N：228-34937-91-SC；S/N：9112373）；
Shim-pack Scepter C18-120（1.9μm，2.1×100mm；P/N：227-31012-05；S/N：116YB00059）；
SHIMSEN Arc Disc HPTFE针式过滤器（P/N：380-00341-05）；
LC/MS认证样品瓶LabTotal Vial（P/N：227-34001-01）；
SHIMSEN Pipet移液枪：SHIMSEN Pipet PMII-10（P/N：380-00751-02）；
SHIMSEN Pipet PMII-100（P/N：380-00751-04）；
SHIMSEN Pipet PMII-1000（P/N：380-00751-06）。
1.2 样品溶液制备
1.2.1 系统适用性溶液
取阿德福韦、阿德福韦单酯与阿德福韦酯对照品，加溶剂溶解并稀释制成每1mL中分别约含阿德福韦、阿德福韦单酯与阿德福韦酯0.5μg、0.5μg、0.2mg的溶液，必要时在冰浴中超声使溶解。
1.2.2 供试品溶液
取本品，精密称定，加溶剂（0.025mol/L磷酸二氢钾溶液-乙腈（82:18））溶解并定量稀释制成每1mL中约含1mg的溶液。
1.2.3 对照溶液
精密量取供试品溶液1mL，置于100mL量瓶中，用溶剂稀释至刻度，摇匀。
1.2.4 灵敏度溶液
供试品溶液稀释2000倍。
1.3 分析条件及结果
1.3.1 HPLC分析条件及结果
分析条件
仪器：Shimadzu LC-20AD
柱温：25℃
流速：1mL/min
检测波长：260nm
进样量：10µL
流动相：A：0.025 mol/L磷酸二氢钾溶液；B：乙腈
梯度条件：
实验结果
按照上述色谱条件（1.3.1）进行采集，色谱图如下：
(1) 色谱柱：Shim-pack Scepter C18-120（5μm，4.6×150mm；P/N：227-31020-05；S/N：115EB00053）；
系统适用性溶液
系统适用性溶液放大图
供试品溶液
对照溶液
灵敏度溶液
(2) 色谱柱：Shim-pack VP-ODS（5μm，4.6×150mm；P/N：228-34937-91-SC；S/N：9112373）；
系统适用性溶液
系统适用性溶液放大图
供试品溶液
对照溶液
灵敏度溶液
1.3.2 UPLC分析条件及结果
分析条件
仪器：Shimadzu LC-40B X3
色谱柱：Shim-pack Scepter C18-120（1.9 μm，2.1×100 mm；P/N：227-31012-05；S/N：116YB00059）
柱温：25℃
流速：0.2mL/min
检测波长：260nm
进样量：1µL
流动相：A：0.5%乙酸铵；B：乙腈
梯度条件：
实验结果
按照上述色谱条件（1.3.2）进行采集，色谱图如下：
系统适用性溶液
供试品溶液
对照溶液
灵敏度溶液
3. 结论
参照2020版《中国药典》中色谱分析条件，采用色谱柱Shim-pack Scepter C18-120 和 Shim-pack VP-ODS，对阿德福韦酯有关物质的系统适用性溶液、供试品溶液、对照溶液和灵敏度溶液进行分析，结果表明，HPLC方法和UPLC方法的系统适用性溶液色谱图中，主成分阿德福韦酯峰与阿德福韦单酯峰间的分离度大于1.5，阿德福韦单酯峰与阿德福韦酯峰间的分离度均大于9，满足《中国药典》要求。此方法可为阿德福韦酯有关物质分析提供参考。