食品（含乳饮料）中香兰素、甲基香兰素、乙基香兰素和香豆素的测定

摘要：本文建立了含乳饮料中香兰素、甲基香兰素、乙基香兰素和香豆素的HPLC测定方法。参照国标GB 5009.284-2021色谱条件并进行优化，采用色谱柱Shim-pack Scepter HD-C18分析含乳饮料中香兰素、甲基香兰素、乙基香兰素，结果显示，香兰素、甲基香兰素、乙基香兰素和香豆素峰形对称，与相邻杂质峰基线分离，满足日常检测要求。此方法可为食品中香兰素、甲基香兰素、乙基香兰素和香豆素的检测提供参考。
关键词：含乳饮料 香兰素 甲基香兰素 乙基香兰素 香豆素 Shim-pack Scepter HD-C18 HPLC

1. 实验部分
1.1 实验仪器及耗材

SShimadzu LC-40D高效液相色谱仪；
色谱柱：Shim-pack Scepter HD-C18（5 μm，4.6×250 mm；P/N：227-31024-06）；
纯水机：PR-FP-0120α-MT1（+ 60L水箱 + 取水器）；
SHIMSEN Arc Disc HPTFE针式过滤器（P/N：380-00341-05）；
LC-MS认证样品瓶LabTotal Vial（P/N：227-34001-01）；

SHIMSEN Pipet移液枪：SHIMSEN Pipet PMII-10（P/N：380-00751-02）；
SHIMSEN Pipet PMII-100（P/N：380-00751-04）；
SHIMSEN Pipet PMII-1000（P/N：380-00751-06）。

1.2 混合标准工作溶液的制备

分别准确称取香兰素、甲基香兰素、乙基香兰素和香豆素标准品适量，加0.1 mol/L甲酸甲醇溶液配制成每1 mL含1 mg的溶液作为标准储备液；分别取香兰素、甲基香兰素、乙基香兰素和香豆素标准储备液适量，加80%甲醇水溶液制成每1 mL分别含香兰素、甲基香兰素、乙基香兰素和香豆素0.1 mg的混合标准工作溶液，混匀，即得。

1.3 试样溶液的制备

称取1.00 g含乳饮料试样，加入5 mL水，涡旋振荡1min，加入20 mL乙腈，涡旋振荡1min，超声提取30min后，加入5 g氯化钠，涡旋振荡2 min，8000 r/min离心5 min，取上清液至旋蒸瓶中，40℃减压浓缩至干，准确加入1.0 mL 80%甲醇水溶液溶解残渣，过0.22 μm 微孔滤膜后，待测。

1.4 分析条件

色谱柱：Shim-pack Scepter HD-C18（5 μm，4.6×250 mm；P/N：227-31024-06）
柱温：30℃
检测波长：279 nm
流速：1.0 mL/min
进样量：10 µL
流动相：A：0.5%甲酸溶液 B：乙腈

2. 实验结果

按照上述色谱条件（1.4）进行采集，混合标准工作溶液和试样溶液色谱图如下：

混合标准工作溶液

试样溶液

重现性

标准溶液重现性

试样溶液重现性

3. 结论

本文建立了含乳饮料中香兰素、甲基香兰素、乙基香兰素和香豆素的HPLC测定方法。参照国标GB 5009.284-2021色谱条件并进行优化，采用色谱柱Shim-pack Scepter HD-C18分析含乳饮料中香兰素、甲基香兰素、乙基香兰素的香豆素，结果显示，香兰素、甲基香兰素、乙基香兰素和香豆素峰形对称，与相邻杂质峰基线分离，满足日常检测要求。此方法可为食品中香兰素、甲基香兰素、乙基香兰素和香豆素的检测提供参考。