人工牛黄中胆红素的测定

摘要：本文建立了人工牛黄中胆红素含量测定的 HPLC 方法。 参照《人工牛黄》 公示稿中色谱条件， 采用色谱柱 Shim-pack GISS C18 进行分析， 胆红素峰形良好， 理论塔板数高于 5000， 满足《人工牛黄》 公示稿要求。此方法可为人工牛黄中胆红素含量测定提供参考。
关键词：人工牛黄 胆红素 Shim-pack GISS C18 HPLC
 

1. 实验部分
1.1 实验仪器及耗材

Shimadzu LC-40D高效液相色谱仪；
色谱柱：Shim-pack GISS C18(5μm，4.6×250 mm；P/N：227-30061-07)；
纯水机：PR-FP-0120α-MT1（+ 60L水箱 + 取水器）；
SHIMSEN Arc Disc HPTFE针式过滤器（P/N：380-00341-05）；
LC-MS认证样品瓶LabTotal Vial（P/N：227-34001-01）；

SHIMSEN Pipet移液枪：SHIMSEN Pipet PMII-10（P/N：380-00751-02）；
SHIMSEN Pipet PMII-100（P/N：380-00751-04）；
SHIMSEN Pipet PMII-1000（P/N：380-00751-06）。

1.2 对照品溶液的制备

取胆红素对照品适量，精密称定，加二氯甲烷制成每1mL含12µg的溶液，即得。

1.3 供试品溶液的制备

取人工牛黄适量，研细，取约100mg，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入二氯甲烷50mL，称重，超声处理30分钟，放冷，再称定重量，用二氯甲烷补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

1.4 分析条件

色谱柱：Shim-pack GISS C18(5μm，4.6×250 mm；P/N：227-30061-07)
柱温：30℃
检测器：PDA450nm
流速：1.0 mL/min
进样量：5 µL
流动相：乙腈-1%冰醋酸溶液（95：5）

2. 实验结果

按照上述色谱条件（1.4）进行采集，对照品溶液和供试品溶液色谱图如下：
对照品溶液

供试品溶液

重现性
对照品溶液重现性

供试品溶液重现性

3. 结论

本文建立了人工牛黄中胆红素含量测定的HPLC方法。参照《人工牛黄》公示稿中色谱条件，采用色谱柱Shim-pack GISS C18进行分析，胆红素峰形良好，理论塔板数高于5000，满足《人工牛黄》公示稿要求。此方法可为人工牛黄中胆红素含量测定提供参考。