麦角固醇有关物质分析

摘要：本文建立了麦角固醇有关物质分析的HPLC测定方法。采用色谱柱Shim-pack Scepter HD-C18分析麦角固醇及其有关物质24，28-去氢麦角甾醇和麦角甾5,7,24(28)-三烯-3B-醇，结果显示，3个化合物色谱峰峰形对称，分离度良好，此方法可为麦角固醇有关物质24，28-去氢麦角甾醇和麦角甾5,7,24(28)-三烯-3B-醇分析提供参考。
关键词：麦角固醇 麦角甾5,7,24(28)-三烯-3B-醇 24,28-去氢麦角甾醇 Shim-pack Scepter HD-C18 HPLC
 

1. 实验部分
1.1 实验仪器及耗材

Shimadzu LC-20AD 高效液相色谱仪；
色谱柱：Shim-pack Scepter HD-C18-80（5μm，4.6×250 mm；P/N：227-301024-06）；
纯水机：PR-FP-0120α-MT1（+ 60L水箱 + 取水器）；
SHIMSEN Arc Disc HPTFE针式过滤器（P/N：380-00341-05）；
LC-MS认证样品瓶LabTotal Vial（P/N：227-34001-01）；

SHIMSEN Pipet移液枪：SHIMSEN Pipet PMII-10（P/N：380-00751-02）；
SHIMSEN Pipet PMII-100（P/N：380-00751-04）；
SHIMSEN Pipet PMII-1000（P/N：380-00751-06）。

1.2 混合对照品溶液的制备：

取麦角固醇供试品适量，加无水乙醇溶解并稀释成1.0mg/mL的供试品溶液；取麦角甾5,7,24(28)-三烯-3B-醇对照品适量，加无水乙醇溶解并稀释成0.1mg/mL的单标母液；取24，28-去氢麦角甾醇对照品适量，加甲醇溶解并稀释成0.08mg/mL的单标母液；取麦角固醇供试品溶液500μL、麦角甾5,7,24(28)-三烯-3B-醇母液80μL、24，28-去氢麦角甾醇母液80μL，混匀，得3个化合物混合对照品溶液，备用。

1.3 分析条件

色谱柱：Shim-pack Scepter HD-C18-80（5μm，4.6×250 mm；P/N：227-31024-06）
流速：1.0 mL/min
进样量：20 µL
柱温：20℃
检测器：201 nm/281 nm
流动相：A：乙腈;B：甲醇 A：B=30：70

2. 实验结果

按照上述色谱条件（1.3）进行采集，混合对照品溶液色谱图如下：
混合对照品溶液（201nm）

混合对照品溶液（281nm）

重现性(201 nm)

3. 结论

本文建立了麦角固醇有关物质的HPLC测定方法。采用色谱柱Shim-pack Scepter HD-C18分析麦角固醇及其有关物质24，28-去氢麦角甾醇和麦角甾5,7,24(28)-三烯-3B-醇，结果显示，3个化合物色谱峰，峰形对称，分离度良好，此方法可为麦角固醇有关物质麦角甾5,7,24(28)-三烯-3B-醇和24，28-去氢麦角甾醇分析提供参考。