鸡蛋中4种喹诺酮类药物残留量的测定

摘要：本研究建立了鸡蛋中4种沙星的测定方法。参照农业部781号公告-6-2006前处理方法，采用岛津的SHIMSEN Styra C18-U产品对鸡蛋样品进行净化，Shim-pack Scepter C18色谱柱进行分离，岛津LC-20AD检测分析。对空白样品加标后（添加浓度：恩诺沙星、环丙沙星和沙拉沙星为10μg/kg，达氟沙星为2μg/kg），按照上述前处理方法处理后上机，平行3份样品考察回收率和RSD，结果显示，加标回收率为72.76-89.45%，RSD为3.98-7.10%，回收率高，重现性好。该方法为鸡蛋中4种沙星的测定提供参考。
关键词：SHIMSEN Styra C18-U 鸡蛋 喹诺酮 HPLC
 

1. 实验部分
1.1 实验仪器及耗材

Shimadzu LC-20AD高效液相色谱仪；
色谱柱：Shim-pack Scepter C18（5μm，4.6×250 mm；P/N：227-31020-06）；
纯水机： PR-FP-0120α-MT1（ + 60L 水箱 + 取水器）；
固相萃取小柱：SHIMSEN Styra C18-U（200mg/3mL；P/N：380-00876-07）；
SHIMSEN Disc HPTFE 针式过滤器（ P/N： 380-00341）；
LC/MS认证样品瓶LabTotal Vial（P/N：227-34001-01）；

SHIMSEN Pipet移液枪：SHIMSEN Pipet PMII-10（P/N：380-00751-02）；
SHIMSEN Pipet PMII-100（P/N：380-00751-04）；
SHIMSEN Pipet PMII-1000（P/N：380-00751-06）。

1.2 分析条件

色谱柱：Shim-pack ScepterC18（5μm，4.6×250 mm；P/N：227-31020-06）
流速：1.0mL/min
进样量：20μL
柱温：25℃
荧光检测器：激发波长：280nm；发射波长：450nm 流动相：A：磷酸/三乙胺溶液（取85%磷酸3.4 mL，加水稀释至1000mL，三乙胺调pH至2.45）；B：乙腈；A：B=82：18

1.3 样品前处理

1.3.1 样品提取

取试料2g于50 mL离心管中，加2mL磷酸盐提取液（称取磷酸二氢钾6.8g，加水溶解并稀释至500 mL，用0.5 M氢氧化钠溶液调pH至6.98），涡旋混匀，超声10min，于10000 r/min离心3min，取出上清液，向残渣中继续加2mL磷酸盐提取液，按照上述操作重复提取1次，合并2次上清液，待净化。

1.3.2 样品净化

SHIMSEN Styra C18-U 200mg/3mL
3mL乙腈、3mL乙腈（30%）-缓冲液*、3mL上述磷酸盐提取液活化，弃去流出液；待净化液上样，弃去流出液；3mL水清洗，弃去流出液，抽干小柱；2mL洗脱液*洗脱，收集流出液，抽干小柱，用洗脱液定容至2mL，涡旋混匀，过0.22μmHPTFE滤膜，供HPLC分析。
缓冲液*：乙腈：磷酸/三乙胺溶液0.05M（取85%的磷酸3.4mL，加水稀释至1000mL，用三乙胺调pH至2.4）=30:70
洗脱液*：乙腈：磷酸/三乙胺溶液0.05M（取85%的磷酸3.4mL，加水稀释至1000mL，用三乙胺调pH至2.4）=30:70

2. 实验结果

2.1 色谱图

2.2 鸡蛋中4种喹诺酮类药物残留量的HPLC检测添加回收结果

将鸡蛋空白样品进行加标后（添加浓度：恩诺沙星、环丙沙星和沙拉沙星为10μg/kg，达氟沙星为2 μg/kg），按照上述前处理方法处理后上机，平行3份样品考察回收率和RSD，具体结果如下：加标回收率为72.76-89.45%，RSD为3.98-7.10%，回收率高，重现性好。

3. 结论

本研究建立了鸡蛋中4种沙星的测定方法。参照农业部781号公告-6-2006前处理方法，采用岛津的SHIMSEN Styra C18-U产品对鸡蛋样品进行净化，Shim-pack Scepter C18色谱柱进行分离，岛津LC-20AD检测分析。对空白样品加标后（添加浓度：恩诺沙星、环丙沙星和沙拉沙星为10μg/kg，达氟沙星为2μg/kg），按照上述前处理方法处理后上机，平行3份样品考察回收率和RSD，结果显示，加标回收率为72.76-89.45%，RSD为3.98-7.10%，回收率高，重现性好。该方法为鸡蛋中恩诺沙星、环丙沙星、沙拉沙星和达氟沙星的测定提供参考。