五维B颗粒中维生素B1、维生素B2、维生素B6、烟酰胺和泛酸钙的测定

摘要：本文建立了五维B颗粒中维生素B1、维生素B2、维生素B6、烟酰胺和泛酸钙的HPLC测定方法。参照公示稿中色谱条件，采用色谱柱Shim-pack GIST C18-AQ分析五维B颗粒，结果显示，混合对照品溶液中，5个目标峰峰型良好，泛酸钙峰保留时间约为30分钟，各个色谱峰之间的分离度大于3.5；供试品溶液中，5个目标峰峰型良好，且与附近杂质的分离度均大于1.5，满足《中国药典》要求。此方法可为五维B颗粒含量测定的检测提供参考。
关键词：五维B颗粒 含量测定 Shim-pack GIST C18-AQ HPLC
 

1. 实验部分
1.1 实验仪器及耗材

Shimadzu LC-40DXR 高效液相色谱仪；
色谱柱：Shim-pack GIST C18-AQ（5 μm，4.6×250 mm；P/N：227-30742-08；S/N：23B72466）；
纯水机： PR-FP-0120α-MT1（ + 60L 水箱 + 取水器）；
SHIMSEN Disc HPTFE 针式过滤器（ P/N： 380-00341）；
LC/MS认证样品瓶LabTotal Vial（P/N：227-34001-01）；

SHIMSEN Pipet移液枪：SHIMSEN Pipet PMII-10（P/N：380-00751-02）；
SHIMSEN Pipet PMII-100（P/N：380-00751-04）；
SHIMSEN Pipet PMII-1000（P/N：380-00751-06）。

1.2 对照品溶液（1）的制备

取维生素B1对照品和泛酸钙对照品各适量，精密称定，加水溶解并定量稀释制成每1 mL中约含维生素B10.6mg、泛酸钙0.2mg的混合溶液。

1.3 对照品溶液（2）的制备

取维生素B6对照品适量，精密称定，加水溶解并定量稀释制成每1mL中约含维生素B60.1 mg的溶液。

1.4 对照品溶液（3）的制备

取维生素B2对照品适量，精密称定，加水适量，超声使分散均匀后，置60℃水浴中加热20分钟，并时时振摇使溶解，冷却至室温，用水定量稀释制成每1mL中约含维生素B275µg的溶液。

1.5 混合对照品溶液的制备

精密称取烟酰胺对照品约10mg，置50mL量瓶中，加水适量使溶解，分别精密加入对照品溶液（1）5mL、对照品溶液（2）2mL、对照品溶液（3）20mL，用水稀释至刻度，摇匀。

1.6 供试品溶液的制备

取装量差异项下的内容物，混合均匀，精密称取适量（约相当于维生素B13mg），置50mL量瓶中，加水约40mL，超声20分钟，时时振摇使溶解，取出，用水稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液。

1.7 分析条件

色谱柱：Shim-pack GIST C18-AQ（5 μm，4.6×250 mm；P/N：227-30742-08；S/N：23B72466）
柱温：35℃
检测波长：210nm（泛酸钙）；285nm（维生素B1、烟酰胺、维生素B6及维生素B2）
流速：1.2mL/min
进样量：20µL
流动相：A：0.05mol/L磷酸二氢铵溶液（用50%磷酸调节pH值至4.2）-甲醇（98：2）；B：甲醇
梯度程序如下：

2. 实验结果

按照上述色谱条件（1.7）进行采集，混合对照品溶液和供试品溶液色谱图如下：
混合对照品溶液（285nm）

混合对照品溶液（210nm）

供试品溶液（285nm）

供试品溶液（210nm）

重现性
混合对照品溶液重现性

供试品溶液重现性

3. 结论

本文建立了五维B颗粒HPLC含量测定方法。参照公示稿中色谱条件，采用色谱柱Shim-pack GIST C18-AQ分析五维B颗粒含量测定，结果显示，混合对照品溶液中，5个目标峰峰型良好，泛酸钙峰保留时间约为30分钟，各个色谱峰之间的分离度大于3.5；供试品溶液中，5个目标峰峰形良好，且与附近杂质的分离度均大于1.5，满足《中国药典》要求。此方法可为五维B颗粒含量测定的检测提供参考。