GC-MSMS法测定川牛膝中多效唑

摘要：本文建立了川牛膝中多效唑的测定方法。采用岛津 SHIMSEN QuEChERS 产品对川牛膝饮片进行提取，SH-I-5Sil MS 色谱柱进行分析，采用岛津气相色谱-质谱联用仪 GCMS-TQ8050 NX 进行检测。结果表明，多效唑及内标磷酸三苯酯峰型对称，重现性好。该方法可为川牛膝（药材、饮片、配方颗粒）中多效唑的测定提供参考。
关键词：SH-I-5Sil MS SHIMSEN QuEChERS 川牛膝 多效唑 GCMS-TQ8050 NX

1. 实验部分
1.1 实验仪器及耗材

仪器配置：岛津 GCMS-TQ8050NX 气相色谱-质谱联用仪；
纯水机：PR-FP-0120α-MT1（+ 60L水箱+取水器）；
色谱柱：SH-I-5Sil MS（30×0.25mm，0.25μm；P/N：R221-75954-30)；
SHIMSEN QuEChERS 提取盐包：6 g 无水 MgSO4，1.5 g 乙酸钠（P/N：380-00151）；
SHIMSEN Disc HPTFE针式过滤器（P/N：380-00341）；
GC-MS认证样品瓶LabTotal Vial（P/N：227-34002-01）；

Nichipet Air 移液枪：Nichipet Air 0.5-10 μL（P/N：00-NAR-10）；
Nichipet Air 10-100 μL（ P/N：00-NAR-100）；
Nichipet Air 100-1000 μL（P/N：00-NAR-1000）；
Nichipet Air 1000-10000 μL（P/N：00-NAR-100006）。

1.2 分析条件

GC条件
毛细管柱：SH-I-5Sil MS（30×0.25mm，0.25μm；P/N：R221-75954-30)
程序升温：初始温度 40℃，以 20℃/min 升温到 220℃，再以 35℃/min 升温到 300℃，保持 6 min。
载气：He
载气控制方式：恒压，146 kPa
进样口温度：240 ℃
进样量：1μL
进样方式：不分流进样

质谱条件
电离模式：电子轰击电离（EI）
离子源温度：200 ℃
接口温度：310 ℃
检测器电压：调谐电压+0.6 Kv
溶剂延迟：6 min
数据采集模式：MRM

各化合物MRM参数见下表：

1.3 样品前处理

1.3.1 对照品溶液的制备

精密量取多效唑对照品（已标示浓度）适量，加丙酮制成每 1mL 含 1 ng、2 ng、5 ng、10 ng、15 ng、20 ng 的溶液，即得。

1.3.2 供试品溶液的制备

取川牛膝饮片粉末（过三号筛）约 2 g，精密称定，置 50 mL 聚苯乙烯具塞离心管中，加入 1%冰醋酸溶液 15 mL，涡旋使药粉充分浸润，放置 30 分钟，精密加入乙腈 15 mL，置涡旋振荡器上剧烈振荡 2000 次/分钟） 15 分钟，于冰浴中冷却 30 分钟（或冷藏放置 30 分钟），加入 SHIMSEN QuEChERS提取盐包（6 g 无水 MgSO4，1.5 g 乙酸钠），立即摇散，再置涡旋振荡器上剧烈振荡（2000 次/分钟）15 分钟，离心（4000 转/分钟）5 分钟，精密量取上清液 5 mL，氮吹至近干，残渣用乙腈溶解并转移至 2 mL 量瓶中，加乙腈稀释至刻度，摇匀，即得。

1.3.3 内标-分析保护剂溶液的配置

取核糖酸内酯 0.5 g，加乙腈 25 mL 使溶解（A 液）；另取山梨醇 0.25 g，加水 12.5 mL 溶解，加乙腈至 25 mL（B 液）。上述 A、B 溶液合并，摇匀，加入磷酸三苯酯溶液（浓度为 10 μg/mL，溶剂为乙腈）0.25 mL，摇匀，即得。

1.3.4 测定法

分别精密量取对照品溶液和供试品溶液各 1 mL，精密加入内标-分析保护剂溶液 0.3 mL，混匀。分别精密吸取上述两种溶液各 1 μL，注入气相色谱-质谱联用仪，按内标标准曲线法进行计算，即得。

2. 实验结果

标准品溶液的 MRM 色谱图

供试品溶液的 MRM 色谱图

重现性

3. 结论

本文建立了川牛膝中多效唑的测定方法。采用岛津 SHIMSEN QuEChERS 产品对川牛膝饮片进行提取，SH-I-5Sil MS 色谱柱进行分析，采用岛津气相色谱-质谱联用仪 GCMS-TQ8050 NX 进行检测。结果表明，多效唑及内标磷酸三苯酯峰型对称，重现性好。该方法可为川牛膝（药材、饮片、配方颗粒）中多效唑的测定提供参考。