法莫替丁

摘要：本文建立了法莫替丁的HPLC测定方法。结果表明，采用色谱柱Shim-pack VP-ODS (4.6×250mm，5μm )分析法莫替丁，在《中国药典》提供的色谱分析条件下，系统适用性溶液中法莫替丁色谱峰的保留时间为10.74分钟，与杂质Ⅰ峰、杂质Ⅱ峰相邻杂质峰的相对保留时间分别为0.88和1.16，分离度分别为2.755、3.318，均远大于1.5，法莫替丁的理论塔板数大于7000，可以满足分析要求。此方法可为法莫替丁的检测提供参考。
关键词：法莫替丁Shim-pack VP-ODS HPLC
 

1. 实验部分
1.1 实验仪器及耗材

Shimadzu LC-20AD高效液相色谱仪
色谱柱：Shim-pack VP-ODS (4.6×250mm，5μm；P/N 228-34937-92)；
SHIMSEN Arc Disc HPTFE针式过滤器（P/N：380-00341-05）；
LC/MS认证样品瓶LabTotal Vial（P/N：227-34001-01）；

SHIMSEN Pipet移液枪：SHIMSEN Pipet PMII-10（P/N：380-00751-02）；
SHIMSEN Pipet PMII-100（P/N：380-00751-04）；
SHIMSEN Pipet PMII-1000（P/N：380-00751-06）。

1.2 分析条件

色谱柱：Shim-pack VP-ODS (4.6×250mm，5μm )
柱温：35℃
检测波长：270nm
流速：1.5mL/min
进样量：10 μL
流动相：A：醋酸盐缓冲液（取醋酸钠13.6g，置900ml水中，用冰醋酸调节pH值至6.0+0.1，加水至1000mL）-乙腈（93:7）
B：乙腈
梯度程序如下：

1.3 系统适用性溶液的制备

取法莫替丁约25mg于50ml容量瓶中，加乙腈2ml、加磷酸盐缓冲液2ml使溶解，加0.5mol/L盐酸溶液3ml，40℃水浴加热5分钟，加0.5mol/L氢氧化钠溶液3ml，再加1mol/L氢氧化钠溶液5ml，60℃水浴加热5分钟，加1mol/L盐酸溶液5ml，用磷酸盐缓冲液稀释成每1ml中约含0.5mg的溶液，摇匀。磷酸盐缓冲液（取磷酸二氢钠13.6g，置900ml水中，用1mol/L氢氧化钠溶液调节pH值至7.0+0.1，加水至1000ml，混匀，取930ml与乙腈70ml混合，即得）

1.4 测定法

精密量取上述溶液20μl，注入液相色谱仪，记录色谱图，调节流动相比例，使法莫替丁色谱峰的保留时间约为10分钟，杂质Ⅰ峰和杂质Ⅱ峰相对法莫替丁的保留时间约0.7和1.2。理论板数按法莫替丁峰计算不低于5000，法莫替丁峰与相邻杂质峰的分离度应大于1.5。

2. 结果及讨论

2.1 色谱图

按照上述色谱条件（1.2）进行采集，系统适应性溶液色谱图如下：

3. 结论

按《中国药典》中色谱条件，建立了法莫替丁系统适用性实验的HPLC测定方法。采用色谱柱Shim-pack VP-ODS (4.6×250mm，5μm )分析法莫替丁，系统适用性溶液中法莫替丁色谱峰的保留时间为10.74分钟，与杂质Ⅰ峰、杂质Ⅱ峰相邻杂质峰的相对保留时间分别为0.88和1.16，分离度分别为2.755、3.318，均远大于1.5，法莫替丁的理论塔板数大于7000，可以满足分析要求。方法可为法莫替丁的检测提供参考。