青霉素钠有关物质分析

摘要：本文建立了青霉素钠有关物质试验的HPLC测定方法。参照《中国药典》中色谱条件，采用色谱柱Shim-pack Scepter C18-120 (4.6×250mm, 5μm)、Shim-pack GIS C18 (4.6×250mm, 5μm)、Shim-pack GIST C18-AQ (4.6×250mm, 5μm)，对青霉素钠有关物质系统适用性溶液和青霉素钠供试品溶液进行分析，系统适用性溶液记录的色谱图与标准谱图一致，各个杂质峰形对称，且灵敏度达到定量标准，满足《中国药典》要求。此方法可为青霉素钠有关物质试验提供参考。
关键词：青霉素钠有关物质 Shim-pack Scepter C18-120 Shim-pack GIS C18 Shim-pack GIST C18-AQ HPLC
 

1. 实验部分
1.1 实验仪器及耗材

Shimadzu LC-20A高效液相色谱仪；
色谱柱：Shim-pack Scepter C18-120 (4.6×250 mm, 5μm; P/N: 227-31020-06; S/N: 106YA80310)；
Shim-pack GIS C18 (4.6×250 mm, 5 μm; P/N: 227-20106-08; S/N: 15K02573)；
Shim-pack GIST C18-AQ (4.6×250 mm, 5 μm; P/N: 227-30742-08; S/N: 18E04160)；
SHIMSEN Arc Disc HPTFE针式过滤器（P/N：380-00341-05）；
LC/MS认证样品瓶LabTotal Vial（P/N：227-34001-01）；

SHIMSEN Pipet移液枪：SHIMSEN Pipet PMII-10（P/N：380-00751-02）；
SHIMSEN Pipet PMII-100（P/N：380-00751-04）；
SHIMSEN Pipet PMII-1000（P/N：380-00751-06）。

1.2 溶液的制备

1.2.1 系统适用性溶液的制备

取青霉素有关物质对照品适量，加水溶解并稀释制成每1 mL中约含4 mg的溶液，作为系统适用性溶液。

1.2.2 供试品溶液的制备

取青霉素样品适量，加水溶解并定量稀释制成每1 mL中约含4 mg的溶液，作为供试品溶液。

1.3 分析条件及结果

1.3.1 分析条件

色谱柱：Shim-pack Scepter C18-120 (4.6×250 mm, 5μm; P/N: 227-31020-06; S/N: 106YA80310)
柱温：34 ℃
检测波长：225 nm
流速：1.0 mL/min
进样量：20 μL
流动相：A：磷酸盐缓冲液（取磷酸二氢钾10.6 g，加水至1000 ml，用磷酸调节 pH值至3.4）-甲醇（72：14）
B：乙腈

实验结果

按照上述色谱条件（1.3.1）进行采集，色谱图如下：

1.3.2 分析条件

色谱柱：Shim-pack GIS C18 (4.6×250 mm, 5 μm; P/N: 227-20106-08; S/N: 15K02573)
柱温：34 ℃
检测波长：225 nm
流速：1.0 mL/min
进样量：20 μL
流动相：A：磷酸盐缓冲液（取磷酸二氢钾10.6 g，加水至1000 ml，用磷酸调节 pH值至3.4）-甲醇（72：14）
B：乙腈

实验结果

按照上述色谱条件（1.3.2）进行采集，色谱图如下：

1.3.3 分析条件

色谱柱：Shim-pack GIST C18-AQ (4.6×250 mm, 5 μm; P/N: 227-30742-08; S/N: 18E04160)
柱温：34 ℃
检测波长：225 nm
流速：1.0 mL/min
进样量：20 μL
流动相：A：磷酸盐缓冲液（取磷酸二氢钾10.6 g，加水至1000 ml，用磷酸调节 pH值至3.4）-甲醇（72：14）
B：乙腈

实验结果

按照上述色谱条件（1.3.3）进行采集，色谱图如下：

2. 结论

本文建立了青霉素钠有关物质试验的HPLC测定方法。参照《中国药典》中色谱条件，采用色谱柱Shim-pack Scepter C18-120 (4.6×250mm, 5μm)、Shim-pack GIS C18 (4.6×250mm, 5μm)、Shim-pack GIST C18-AQ (4.6×250mm, 5μm)，对青霉素钠有关物质系统适用性溶液和青霉素钠供试品溶液进行分析，系统适用性溶液记录的色谱图与标准谱图一致，各个杂质峰形对称，且灵敏度达到定量标准，满足《中国药典》要求。此方法可为青霉素钠有关物质试验提供参考。