苍耳子分析

摘要：本文建立了苍耳子的HPLC测定方法。结果表明，采用色谱柱Shim-pack GIS C18 (4.6×250 mm，5 μm)和Shim-pack VP-ODS (4.6×250 mm，5 μm)分析苍耳子，以绿原酸为质量评价依据，Shim-pack GIS C18和Shim-pack VP-ODS检测绿原酸峰理论塔板数均大于3000，但是苍耳子在上述色谱条件下，采用Shim-pack VP-ODS色谱柱, 柱效和Shim-pack GIS C18色谱柱相当，保留时间比Shim-pack GIS C18大约提前13 min。满足《中国药典》要求。此两种方法均可为苍耳子的检测提供参考。
关键词：苍耳子 Shim-pack VP-ODS Shim-pack GIS C18 HPLC
 

1. 实验部分
1.1 实验仪器及耗材

Shimadzu LC-20高效液相色谱仪；
色谱柱：Shim-pack GIS C18 (4.6×250 mm，5 μm; P/N：227-30106-08)

Shim-pack VP-ODS (4.6×250 mm, 5 μm; P/N：228-34937-92)

SHIMSEN Arc Disc HPTFE针式过滤器（P/N：380-00341-05）；
LC/MS认证样品瓶LabTotal Vial（P/N：227-34001-01）；

SHIMSEN Pipet移液枪：SHIMSEN Pipet PMII-10（P/N：380-00751-02）；
SHIMSEN Pipet PMII-100（P/N：380-00751-04）；
SHIMSEN Pipet PMII-1000（P/N：380-00751-06）。

1.2 分析条件

色谱柱：Shim-pack GIS C18 (4.6×250 mm，5 μm)

Shim-pack VP-ODS (4.6×250 mm, 5 μm)

流动相：乙腈-0.4%磷酸溶液(9:91)
柱温： 35 ℃
检测波长：327 nm
流速：1.0 mL/min
进样量：5 μL

1.3 对照品溶液的制备

取绿原酸对照品适量，精密称定，置棕色量瓶中，加50%甲醇制成每l mL含50 μg的溶液，即得（10℃以下保存）。

1.4 供试品溶液的制备

取本品粉末（过三号筛）约0.5 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入5%甲酸的50%甲醇溶液25 mL，称定重量，超声处理(功率300 W，频率40 kHz)40分钟，放冷，再称定重量，用5%甲酸的50%甲醇溶液补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液（置棕色瓶中），即得。

2. 结果讨论

2.1 色谱图

按照上述色谱条件（1.2）进行采集，对照品溶液色谱图和样品色谱图如下：
1）Shim-pack GIS C18 (4.6×250 mm，5 μm)
绿原酸对照品溶液：

供试品溶液:

2.2 标准曲线、重现性

配制一系列浓度的绿原酸标准溶液。上述实验条件（1.2）进行采集。各组分标准曲线和重现性结果如下所示。
绿原酸标准曲线 ：                                                                                       绿原酸的重复性：

2）Shim-pack VP-ODS (4.6×250 mm，5 μm)
绿原酸对照品溶液：

供试品溶液:

3. 结论

参考《中国药典》中色谱条件，并对其条件进行优化，最终建立了苍耳子的HPLC测定方法。结果表明，采用色谱柱Shim-pack GIS C18 (4.6×250 mm，5 μm)和Shim-pack VP-ODS (4.6×250 mm，5 μm)分析苍耳子，以绿原酸为质量评价依据，Shim-pack GIS C18和Shim-pack VP-ODS检测绿原酸峰理论塔板数均大于3000，但是苍耳子在上述色谱条件下，采用Shim-pack VP-ODS色谱柱, 柱效和Shim-pack GIS C18色谱柱相当，保留时间比Shim-pack GIS C18大约提前13 min。满足《中国药典》要求。此两种方法均可为苍耳子的检测提供参考。