金银花中酚酸类含量测定

摘要：本文建立了金银花中酚酸类含量测定的HPLC测定方法。结果表明，按照2020版《中国药典》中色谱条件，采用色谱柱Shim-pack VP-ODS分析金银花中的绿原酸、3,5-二-O-咖啡酰奎宁酸、4,5-二-O-咖啡酰奎宁酸，各化合物峰形对称，理论塔板数按绿原酸峰计算远高于10000，且各目标物峰与相邻杂质峰能达到基线分离，满足《中国药典》要求。此方法可为金银花中酚酸类的检测提供参考。
关键词：金银花 酚酸类 Shim-pack VP-ODS HPLC
 

1. 实验部分
1.1 实验仪器及耗材

Shimadzu LC-20AD高效液相色谱仪；
色谱柱：Shim-pack VP-ODS（5 μm，4.6×250 mm；P/N：228-34937-92；S/N：9052614）；
SHIMSEN Arc Disc HPTFE针式过滤器（P/N：380-00341-05）；
LC/MS认证样品瓶LabTotal Vial（P/N：227-34001-01）；

SHIMSEN Pipet移液枪：SHIMSEN Pipet PMII-10（P/N：380-00751-02）；
SHIMSEN Pipet PMII-100（P/N：380-00751-04）；
SHIMSEN Pipet PMII-1000（P/N：380-00751-06）。

1.2 对照品溶液的制备

取绿原酸对照品、3,5-二-O-咖啡酰奎宁酸对照品和4,5-二-O-咖啡酰奎宁酸对照品适量，精密称定，置棕色量瓶中，加75%甲醇制成每1 mL含0.28 mg、0.15 mg、44 μg的溶液，即得。

1.3 供试品溶液的制备

取本品粉末（过四号筛）约0.5 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加人75%甲醇50 mL，称定重量，超声处理（功率500 W，频率40 kHz）30分钟，放冷，再称定重量，用75%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

1.4 分析条件

色谱柱：Shim-pack GIS C18（5 μm，4.6×250 mm；P/N：227-30106-08；S/N：19L09479）
柱温：25℃
检测波长：327 nm
流速：0.7 mL/min
进样量：2 µL
流动相：A：0.1%磷酸溶液   B：乙腈

2. 结果及讨论

按照上述色谱条件（1.4）进行采集，对照品溶液和供试品溶液色谱图如下：
对照品溶液：

供试品溶液：

供试品溶液放大图：

供试品溶液重现性

3. 结论

按照2020版《中国药典》中色谱条件，建立了金银花中酚酸类含量测定方法。结果表明，采用色谱柱Shim-pack VP-ODS分析金银花中的绿原酸、3,5-二-O-咖啡酰奎宁酸、4,5-二-O-咖啡酰奎宁酸，各化合物峰形对称，理论塔板数按绿原酸峰计算远高于10000，且各化合物峰与相邻杂质峰能达到基线分离，满足《中国药典》要求。此方法可为金银花中酚酸类的检测提供参考。