蟾酥中华蟾酥毒基、蟾毒灵和脂蟾毒配基的测定

摘要：本文建立了蟾酥含量测定的HPLC方法。参照2020版《中国药典》蟾酥含量测定项下的色谱条件，采用色谱柱ShimNex CS C18，对蟾酥样品进行分析，结果显示以华蟾酥毒基为参照峰，蟾毒灵和脂蟾毒配基的相对保留时间均在规定值的±5%范围内，理论塔板数按华蟾酥毒基计算远高于10000，且各目标物峰与相邻杂质峰能达到基线分离，峰形和重现性良好，满足《中国药典》要求。此方法可为蟾酥含量测定提供参考。
关键词：蟾酥 含量测定 ShimNex CS C18 HPLC
 

1. 实验部分
1.1 实验仪器及耗材

Shimadzu LC-20D高效液相色谱仪；
色谱柱：ShimNex CS C18（5 μm, 4.6×250 mm; P/N: 380-01230-01）；
SHIMSEN Arc Disc HPTFE针式过滤器（P/N：380-00341-05）；
LC/MS认证样品瓶LabTotal Vial（P/N：227-34001-01）；

SHIMSEN Pipet移液枪：SHIMSEN Pipet PMII-10（P/N：380-00751-02）；
SHIMSEN Pipet PMII-100（P/N：380-00751-04）；
SHIMSEN Pipet PMII-1000（P/N：380-00751-06）。

1.2 对照品溶液的制备

取华蟾酥毒基对照品适量，精密称定，加甲醇制成1 mL含100 μg的溶液，即得。

1.3 供试品溶液的制备

取本品细粉约25 mg，精密称定，置于具塞锥形瓶中，精密加入甲醇20 mL，称定重量，加热回流1小时，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

1.4 分析条件

ShimNex CS C18（5 μm, 4.6×250 mm; P/N: 380-01230-01）
柱温：28 ℃
检测波长：296 nm
流速：0.6 mL/min
进样量：10 µL
流动相： 流动相： A：0.3%乙酸溶液 B：乙腈

2. 实验结果

按照上述色谱条件（1.4）进行采集，对照品溶液和供试品溶液色谱图如下：

对照品溶液：

供试品溶液：

供试品溶液重现性：

3. 结论

本文建立了蟾酥含量测定的HPLC方法。参照2020版《中国药典》蟾酥含量测定项下的色谱条件，采用色谱柱ShimNex CS C18，对蟾酥样品进行分析，结果显示以华蟾酥毒基为参照峰，蟾毒灵和脂蟾毒配基的相对保留时间均在规定值的±5%范围内，理论塔板数按华蟾酥毒基计算远高于10000，且各目标物峰与相邻杂质峰能达到基线分离，峰形和重现性良好，满足《中国药典》要求。此方法可为蟾酥含量测定提供参考。