融合蛋白纯度的测定（分子排阻法）

摘要：本文建立了融合蛋白纯度（分子排阻法）的 HPLC 测定方法。结果表明，采用色谱柱 ShimSen SECH 300 (7.8*300mm，3μm)分析融合蛋白，主峰与多聚体的分离度良好，此方法可为融合蛋白纯度（分子排阻法）检测提供参考。
关键词：融合蛋白 分子排阻法 ShimSen SEC-H 300 HPLC
 

1. 实验部分
1.1 实验仪器及耗材

Shimadzu Nexera Bio 液相色谱仪；
色谱柱：ShimSen SEC-H 300 （3 μm，7.8×300 mm；P/N：380-01005-04 ）；
SHIMSEN Arc Disc HPTFE针式过滤器（P/N：380-00341-05）；
GC-MS认证样品瓶LabTotal Vial（P/N：227-34001-01）；

SHIMSEN Pipet移液枪：SHIMSEN Pipet PMII-10（P/N：380-00751-02）；
SHIMSEN Pipet PMII-100（P/N：380-00751-04）；
SHIMSEN Pipet PMII-1000（P/N：380-00751-06）。

1.2 供试品溶液

客户提供（80 mg/mL）

1.3 HPLC 条件

色谱柱：ShimSen SEC-H 300 （3 μm，7.8×300 mm；P/N：380-01005-04 ）；
柱温：25 ℃
检测波长：280 nm
流速：0.5 mL/min
进样量：1 µL
流动相： 150 mmol/L 磷酸盐溶液（pH 7.0）-0.5 mol/L 氯化钠溶液
 

2. 结果及讨论

按照上述色谱条件（1.3）进行采集，供试品溶液色谱图如下：

重现性 （平行进样 3 针）

3. 结论

本文建立了融合蛋白纯度（分子排阻法）的 HPLC 测定方法。结果表明，采用色谱柱 ShimSen SECH 300 (7.8*300mm，3μm)分析融合蛋白，主峰与多聚体的分离度良好，此方法可为融合蛋白纯度（分子排阻法）检测提供参考。