食品中维生素D的测定（第3法）

摘要：本文建立了维生素D2和维生素D3的LC-MS/MS测定方法。参照新国标《食品中维生素D的测定》征求意见稿中色谱条件，采用色谱柱ShimNex S-C18-PAH分析维生素D2和维生素D3及其内标，结果显示，4个化合物峰形对称，维生素D2和维生素D3达到基线分离，满足日常检测需求。此方法可为食品中维生素D2和D3的检测提供参考。
关键词：食品、维生素D2和维生素D3、ShimNex S-C18-PAH、LC-MS/MS

1. 实验部分
1.1 实验仪器及耗材

Shimadzu LC-30AD与LCMS-8050联用系统；
色谱柱：ShimNex S-C18-PAH（3μm，2.1×100mm；P/N：380-01247-09）；
纯水机：PR-FP-0120α-MT1（+60L水箱 +取水器）；
SHIMSEN Arc Disc HPTFE 针式过滤器（P/N：380-00341-05）；
LC/MS 认证样品瓶 LabTotal Vial（P/N：227-34001-01）；

SHIMSEN Pipet移液枪：SHIMSEN Pipet PMII-10（P/N：380-00751-02）；
SHIMSEN Pipet PMII-100（P/N：380-00751-04）；
SHIMSEN Pipet PMII-1000（P/N：380-00751-06）。

1.2 混合对照品溶液的制备

1.2.1 单标溶液的配制：

分别称取维生素D2对照品和维生素D3对照品适量，加甲醇制成每1mL各含1mg的单标溶液。

1.2.2 混合对照品溶液的配制：

分别精密量取上述维生素D2和维生素D3单标溶液、VD2-d3内标溶液母液及VD3-d3内标溶液母液各单标溶液适量，用甲醇稀释制成混合对照品溶液，使得维生素D2的最终浓度为400ng/mL；维生素D3和VD2-d3内标溶液的最终浓度为200ng/mL；VD3-d3内标溶液的最终浓度为100ng/mL。

1.3 分析条件

UHPLC条件
色谱柱：ShimNex S-C18-PAH（3μm，2.1×100mm；P/N：380-01247-09）；
柱温：35°C
流速：0.4mL/min
进样量：10µL
流动相：A：5mM甲酸铵水溶液+0.05%甲酸 B：5mM甲酸铵甲醇溶液+0.05%甲酸

质谱条件
离子化模式：ESI，正离子扫描
碰撞气：氩气
雾化气：氮气 3 L/min
接口温度：300℃
加热模块温度：400 ℃
扫描模式：多反应监测(MRM)
加热气：干燥空气 10 L/min
干燥气：氮气 10 L/min
DL温度：400 ℃

各化合物MRM参数见下表：

2 实验结果

按照上述色谱条件（1.3）进行采集，混合对照品溶液MRM色谱图如下：
混合对照品溶液:

重现性:

系统适用性溶液重现性

3. 结论

本文建立了维生素D2和维生素D3的LC-MS/MS测定方法。参照新国标《食品中维生素D的测定》征求意见稿中色谱条件，采用色谱柱ShimNex S-C18-PAH分析维生素D2和D3及其内标，结果显示，4个化合物峰形对称，维生素D2和维生素D3达到基线分离，满足日常检测需求。此方法可为食品中维生素D2和维生素D3的检测提供参考。