火锅底料等食品中吗啡、可待因、罂粟碱、那可丁和蒂巴因的测定
2024年2月07日
摘要：本研究建立了火锅底料中吗啡、可待因、罂粟碱、那可丁和蒂巴因的测定方法。参照BJS 201802前处理方法，采用岛津SHIMSEN QuEChERS盐包对火锅底料样品进行提取，Shim-pack Velox HILIC色谱柱进行分离，岛津串联质谱LCMS-8060NX检测分析。对空白样品加标后（添加浓度：罂粟碱、那可丁和蒂巴因为8μg/kg；吗啡和可待因为40μg/kg），按照上述前处理方法处理后上机，平行3份样品考察回收率和RSD，结果显示，加标回收率为62.05%-106.27%，RSD为2.81%-5.92%，回收率高，重现性好。该方法为火锅底料等食品中吗啡、可待因、罂粟碱、那可丁和蒂巴因的测定提供参考。
关键词：SHIMSEN QuEChERS 吗啡 可待因 罂粟碱 那可丁 蒂巴因 火锅底料 LCMSMS
1. 实验部分
1.1 实验仪器及耗材
Shimadzu LC-40BX3与LCMS-8060NX联用系统；
色谱柱：Shim-pack Velox HILIC（2.7μm，2.1×100mm；P/N：227-32025-03）；
纯水机：PR-FP-0120α-MT1（+ 60L水箱+取水器）；
SHIMSEN QuEChERS Extraction Salts（6g无水MgSO4，1.5g NaOAC；P/N：380-00151）；
SHIMSEN Disc HPTFE针式过滤器（P/N：380-00341）；
LC/MS认证样品瓶LabTotal Vial（P/N：227-34001-01）；
SHIMSEN Pipet移液枪：SHIMSEN Pipet PMII-10（P/N：380-00751-02）；
SHIMSEN Pipet PMII-100（P/N：380-00751-04）；
SHIMSEN Pipet PMII-1000（P/N：380-00751-06）。
1.2 分析条件
UHPLC条件
色谱柱：Shim-pack Velox HILIC（2.7μm，2.1×100 mm；P/N：227-32025-03） 流速：0.3mL/min
进样量：5 μL
柱温：30 ℃
流动相：A：含0.1%甲酸的10 mmol/L甲酸铵溶液；B：0.1%甲酸乙腈溶液
梯度程序如下：
质谱条件
离子化模式：ESI，正离子扫描
碰撞气：氩气
雾化气：氮气3 L/min
接口温度：400℃
加热模块温度：400℃
扫描模式：多反应监测(MRM)
加热气：干燥空气15L/min
干燥气：氮气3L/min
DL温度：250℃
各化合物MRM参数见下表：
1.3 样品前处理
吗啡、可待因：
称取2 g试样（精确至0.01g）于50 mL聚四氟乙烯具塞离心管中，加入60μL同位素内标工作溶液（5.0μg/mL），加入5 mL盐酸溶液。涡旋振荡30 s，准确加入15 mL乙腈，密塞，振荡涡旋1 min，超声处理30 min，加入SHIMSEN QuEChERS Extraction Salts（6g无水MgSO4，1.5g无水NaOAC）混合粉末，立即涡旋振荡2 min，使吸附样品中的全部水分，以4000 r/min离心5min，取上清液，用0.22μm滤膜过滤。取续滤液适量，待LCMSMS分析。流程图见下图1。
罂粟碱、那可丁、蒂巴因的提取：
称取2 g试样（精确至0.01g）于50 mL聚四氟乙烯具塞离心管中，加入60μL同位素内标工作溶液（5.0μg/mL），加入5 mL盐酸溶液。再分别涡旋振荡30 s，准确加入15 mL乙腈，密塞，涡旋振荡1 min，超声处理30 min，加入SHIMSEN QuEChERS Extraction Salts（6g无水MgSO4，1.5g无水NaOAC）混合粉末，立即涡旋振荡2 min，使吸附样品中的全部水分，以4000 r/min离心5min，取上清液，用0.22μm滤膜过滤。准确量取续滤液1 mL至20 mL量瓶中，用乙腈稀释至刻度，摇匀，待LCMSMS分析。流程图见下图2。
2. 实验结果
2.1 标准品溶液的MRM色谱图
2.2 火锅底料中吗啡、可待因、罂粟碱、那可丁和蒂巴因的LC-MS/MS检测添加回收结果
将火锅底料空白样品加标后（添加浓度：罂粟碱、那可丁和蒂巴因为8μg/kg；吗啡和可待因为40 μg/kg），按照上述前处理方法处理后上机，平行3份样品考察回收率和RSD，具体结果如下：加标回收率为62.05%-106.27%，RSD为2.81%-5.92%。
3. 结论
本研究建立了火锅底料中吗啡、可待因、罂粟碱、那可丁和蒂巴因的测定方法。参照BJS 201802前处理方法，采用岛津SHIMSEN QuEChERS盐包对火锅底料样品进行提取，Shim-pack Velox HILIC色谱柱进行分离，岛津串联质谱LCMS-8060NX检测分析。对空白样品加标后（添加浓度：罂粟碱、那可丁和蒂巴因为8μg/kg；吗啡和可待因为40 μg/kg），按照上述前处理方法处理后上机，平行3份样品考察回收率和RSD，结果显示，加标回收率为62.05%-106.27%，RSD为2.81%-5.92%，回收率高，重现性好。该方法为火锅底料等食品中吗啡、可待因、罂粟碱、那可丁和蒂巴因的测定提供参考。