盐酸雷尼替丁胶囊中 N,N-二甲基亚硝胺（NDMA）的测定

摘要：研究建立了盐酸雷尼替丁胶囊中 N,N-二甲基亚硝胺的测定方法。采用岛津基毒专用柱 ShimNex S-GTIs 进行分离，岛津串联质谱 LCMS-8050 检测分析。结果显示，NDMA 峰型良好，且 NDMA 和雷尼替丁完全分离。该方法可为盐酸雷尼替丁胶囊中 N,N-二甲基亚硝胺的测定提供参考。
关键词：ShimNex S-GTIs 雷尼替丁胶囊 N,N-二甲基亚硝胺 LCMSMS

1. 实验部分
1.1 实验仪器及耗材

Shimadzu LC-30A 与 LCMS-8050 联用系统；
色谱柱：ShimNex S-GTIs（3 μm，4.6×150 mm；P/N：380-01247-31）；
纯水机：PR-FP-0120α-MT1（+ 60L水箱+取水器）；
SHIMSEN Disc HPTFE针式过滤器（P/N：380-00341）；
LC/MS认证样品瓶LabTotal Vial（P/N：227-34001-01）；

Nichipet Air 移液枪：Nichipet Air 0.5-10 μL（P/N：00-NAR-10）；
Nichipet Air 10-100 μL（ P/N：00-NAR-100）；
Nichipet Air 100-1000 μL（P/N：00-NAR-1000）；
Nichipet Air 1000-10000 μL（P/N：00-NAR-100006）。

1.2 溶液的制备：

1.2.1 对照品溶液的制备：

取 N,N-二甲基亚硝胺（NDMA）对照品适量，加水溶解并稀释至 1 ng/mL，备用。

1.2.2 供试品溶液的制备：

取盐酸雷尼替丁胶囊内容物适量，加水 5 mL，涡旋混匀，振荡 40 min，8000 rpm 离心 5 min，取上清液过 0.22 μm 微孔滤膜，最终浓度以 API 计为 30 mg/mL，备用。

1.2.3 供试品加标溶液的制备：

取盐酸雷尼替丁胶囊内容物适量，加 N,N-二甲基亚硝胺（NDMA）对照品溶液适量（添加浓度为：0.1 mg/kg），加水 5 mL，涡旋混匀，振荡 40 min，8000 rpm 离心 5 min，取上清液过 0.22 μm 微孔滤膜，最终浓度以 API 计为 30 mg/mL，备用。

1.3 分析条件

UHPLC条件
色谱柱：ShimNex S-GTIs（3 μm，4.6×150 mm；P/N：380-01247-31）
流速：0.8mL/min
进样量：10 μL
柱温：60 ℃
切阀程序：0 min（废液）→ 4.2 min（MS）→ 6.8 min（废液）
流动相：A：0.1%甲酸水；B：0.1%甲酸甲醇
梯度程序如下：

质谱条件
离子化模式：APCI，正离子扫描
碰撞气：氩气
雾化气：氮气 3 L/min
接口温度： 350℃
加热模块温度：200 ℃
扫描模式：多反应监测 (MRM)
接口电压：4.5 kV
干燥气：氮气 5 L/min
DL 温度：150 ℃
各化合物 MRM 参数见下表

2. 实验结果

盐酸雷尼替丁胶囊供试品溶液、盐酸雷尼替丁胶囊供试品加标溶液、NDMA 对照品溶液色谱图如下：

为了避免高浓度的雷尼替丁成品药物进入质谱，造成污染，实验中通过调整液相洗脱程序，实现N,N-二甲基亚硝胺（NDMA）杂质与雷尼替丁药物进行分离，通过二位流通阀，0~4.2 min 时间内以及 6.8~15 min 雷尼替丁出峰时间内切入废液，4.2~6.8 min 切至质谱，进行质谱监控，由于不同色谱系统的延迟体积的差异，N,N-二甲基亚硝胺杂质与雷尼替丁的保留时间会发生变化，建议配置紫外检测器进行色谱图的监控。
方案中供试品溶液中检测到了 0.1 mg/kg 的NMDA，可能是因为使用 60℃ 高柱温导致雷尼替丁降解产生NDMA，建议采用 25℃ 或 30℃ 进行检测，以防止假阳性或高含量 NDMA 检出现象的产生。

3. 结论

本研究建立了盐酸雷尼替丁胶囊中 N,N-二甲基亚硝胺的测定方法。采用岛津基毒专用柱 ShimNex S-GTIs 进行分离，岛津串联质谱 LCMS-8050 检测分析。结果显示，NDMA 峰型良好，且 NDMA 和雷尼替丁完全分离。该方法可为盐酸雷尼替丁胶囊中 N,N-二甲基亚硝胺的测定提供参考。