中药材中74种农药残留的检测

摘要：中国药典2010版采用气相色谱法分析中药材及制剂中24种农药残留，与国际标准监控的农药品种有较大差距。因此，2015版药典在2010版药典的基础上不仅增加了检测农药的种类，还将质谱法引入药典标准，利用GC-MS/MS方法检测中药中74种农药残留，利用LC-MS/MS方法检测中药中153种农药残留。 本文建立了中药中153种农药残留的液相方法。结果表明，使用岛津的SHIMSEN QuEChERS产品对中药材进行提取净化预处理，Shim-pack XR-ODSIII（2.0×150 mm，2.2μm）进行分析。1.0~100 μg/L范围内线性良好；在党参基质下，校准曲线相关系数均大于0.995，加标回收率符合药典规定。该方法分析速度快、重复性好、灵敏度高，适合中药中农药的高灵敏度快速检测，可以应对2015 版《中国药典》对中药材中农药残留量的测定要求。
关键词：农药残留 Shim-pack XR-ODSIII SHIMSEN QuEChERS
 

1. 实验部分
1.1 实验仪器及耗材

LC-30A与三重四极杆质谱仪LCMS-8050联用系统；
色谱柱：Shim-pack XR-ODSIII（2.0×150 mm，2.2μm;P/N 228-59910-91）
SHIMSEN QuEChERS提取管（含有6g无水硫酸镁，1.5g无水醋酸钠；P/N：380-00151）
SHIMSEN QuEChERS 15ml C18/PSA/GC-e/硅胶净化管（P/N：380-00134）
SHIMSEN Arc Disc HPTFE针式过滤器（P/N：380-00341-05）；
LC/MS认证样品瓶LabTotal Vial（P/N：227-34001-01）；

SHIMSEN Pipet移液枪：SHIMSEN Pipet PMII-10（P/N：380-00751-02）；
SHIMSEN Pipet PMII-100（P/N：380-00751-04）；
SHIMSEN Pipet PMII-1000（P/N：380-00751-06）。

1.2 分析条件
色谱条件

色谱柱：Shim-pack XR-ODSIII（2.0×150 mm，2.2μm）
流 速：0.4 mL/min
进样量：1 μL
柱 温：40 ℃
流 动 相：A-10 mM甲酸铵+0.1%甲酸水溶液；B-甲醇
洗脱方式：梯度洗脱，B相初始浓度为30%，

质谱条件

分析仪器： LCMS-8050
离子源： ESI，正负离子同时扫描
离子源接口电压： +4.5 kV; -3.5 kV
雾化气： 氮气 2.0 L/min
干燥气： 氮气 10 L/min
加热气： 空气 10 L/min
碰撞气： 氩气

脱溶剂管温度： 200℃
加热模块温度： 400℃
接口温度： 300℃
扫描模式： 多反应监测（MRM）
驻留时间： 1.0-8.0 ms
延迟时间： 1 ms
MRM参数： 见附表

1.3 样品制备

参照2015版药典通则2341，使用岛津QuEChERS产品进行样品前处理。具体为：精密称定3 g均质样品，置50mL聚苯乙烯具塞离心管中，加入1%冰乙酸溶液15 mL，涡旋使药粉充分浸润，放置30分钟，精密加入乙腈15mL，涡旋使混匀，置振荡器上剧烈震荡(500次/min)5分钟，加入无水硫酸镁与无水乙酸钠的混合粉末(4:1)7.5 g（货号：380-00151），立即摇散，再置振荡器上剧烈震荡(500次/min)3分钟，于冰浴中冷却10分钟，离心(4000转/min)5分钟，取上清液9 mL，置已预先装有净化材料的分散固相萃取净化管[无水硫酸镁900 mg，N-丙基乙二胺(PSA) 300 mg，十八烷基硅烷键合硅胶300 mg，石墨化炭黑90mg，硅胶300mg，货号：380-00134]中，涡旋使充分混匀，再置振荡器上剧烈震荡(500次/min)5分钟使净化完全，离心(4000转/min)5分钟，精密吸取上清液1 mL，用微孔滤膜(0.22 μm)滤过，取续滤液，即得。

标准溶液配制：使用空白基质配制浓度为1.0 μg/L、5.0 μg/L、10.0 μg/L、25.0 μg/L、50.0 μg/L和100.0 μg/L的不同浓度的标准样品。

2. 结果及讨论

2.1 色谱图

标准品MRM色谱图

2.2 线性关系

将配制的1.0 μg/L、5.0 μg/L、10.0 μg/L、25 μg/L、50.0 μg/L和100.0 μg/L不同浓度的标准溶液，按1.2中的分析条件进行测定，根据2015药典通则2341要求，液相色谱-串联质谱法推荐氘代莠去津作为内标，利用内标法制作校准曲线，线性良好，线性方程、相关系数和线性范围见表3。根据2015版药典通则2341规定，定性离子与定量离子比例大于50%，允许20%偏差；比例在20%～50%之间，允许25%偏差；比例在10%～20%之间，允许偏差30%；比例小于10%，允许偏差50%。




2.3 基质提取液加标精密度实验

对空白党参样品按照1.3中处理方法加标至10.0 μg/L浓度，平行处理6份，考察保留时间和浓度的重复性结果如表2所示。




2.4 金银花样品中153种农残残留检测

金银花样品中检测到多菌灵、杀扑磷和氧甲拌磷砜3种农药残留，具体残留量见表5.

3. 结论

参考《中国药典》中色谱条件，并对其条件进行优化，最终建立了中药中153种农药残留的液相方法。结果表明，使用岛津的SHIMSEN QuEChERS产品对中药材进行提取净化预处理，Shim-pack XR-ODSIII（2.0×150 mm，2.2μm）进行分析。1.0~100 μg/L范围内线性良好；在党参基质下，校准曲线相关系数均大于0.995，加标回收率符合药典规定。该方法分析速度快、重复性好、灵敏度高，适合中药中农药的高灵敏度快速检测，可以应对2015 版《中国药典》对中药材中农药残留量的测定要求。