鸡肉中金刚烷胺的测定

摘要：建立了鸡肉中金刚烷胺的测定方法。采用岛津的WondaSep MCX固相萃取小柱对鸡肉样品进行净化，Shim-pack GIST C18色谱柱进行分离，串联质谱检测分析。对空白样品2.0 μg/kg浓度加标后，按照上述前处理方法处理后上机，平行5份样品考察回收率和RSD，结果显示，2.0 μg/kg加标浓度的加标回收率为84.19%-87.67%，RSD为1.55%，回收率高，重现性好。该方法适用于鸡肉中金刚烷胺的测定。
关键词：金刚烷胺 鸡肉 WondaSep MCX Shim-pack GIST C18 LC-MSMS
 

1. 实验部分
1.1 实验仪器及耗材

仪器配置：Shimadzu LC-30A 与 LCMS-8050 联用系统；
色谱柱：Shim-pack GIST C18，50×2.1 mm，2 μm (P/N：227-30001-02)；
固相萃取小柱：WondaSep MCX 60 mg/3mL
SHIMSEN Arc Disc HPTFE针式过滤器（P/N：380-00341-05）；
LC/MS认证样品瓶LabTotal Vial（P/N：227-34001-01）；

SHIMSEN Pipet移液枪：SHIMSEN Pipet PMII-10（P/N：380-00751-02）；
SHIMSEN Pipet PMII-100（P/N：380-00751-04）；
SHIMSEN Pipet PMII-1000（P/N：380-00751-06）。

1.2 分析条件

    UHPLC 条件

色谱柱：Shim-pack GIST C18，50×2.1 mm，2 μm (P/N：227-30001-02)
流 速：0.4 mL/min
进样量：5 μL
柱 温：40 ℃
流动相： A：0.1%甲酸水 B：乙腈

梯度洗脱程序如下：

质谱条件

金刚烷胺MRM参数见下表

1.3 样品前处理

1.3.1样品提取

称取1.0 g鸡肉样品于50 mL离心管中，加10 mL 甲醇-1%三氯乙酸（1：1），手动振摇1 min，8000 r/min离心2 min，取5 mL上清液待净化。

1.3.2 样品净化

       WondaSep MCX 60 mg/3 mL

3 mL甲醇、3 mL 2 mol/L盐酸水溶液活化，弃去流出液；5 mL待净化液上样，弃去流出液；2.5 mL 2 mol/L盐酸水溶液、2.5 mL70%甲醇水清洗，弃去流出液；3 mL10%氨水甲醇洗脱，收集流出液；向洗脱液中加水定容至5 mL，过0.22 μm微孔滤膜，供LC-MS/MS分析。流程图见下图1。

1.4 标准曲线的绘制

取空白样品，按上述1.3.1和1.3.2处理，使用空白基质配制浓度分别为0.1 μg/L、0.2 μg/L、1 μg/L、5 μg/L、10μg/L、50 μg/L和100 μg/L的标准样品。

2. 结果及讨论

2.1 标准品的MRM色谱图

2.2 线性范围

取空白溶液配制混合工作液，得到0.1 μg/L、0.2 μg/L、1 μg/L、5 μg/L、10μg/L、50 μg/L和100 μg/L不同浓度的样品，按1.2中的分析条件进行测定，外标法定量。以浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制标准曲线，如图2所示。线性方程、相关系数、线性范围见表1。

2.3 鸡肉中金刚烷胺的LC-MS/MS检测添加回收结果

将鸡肉空白样品进行2.0 μg/kg浓度加标后，按照上述前处理方法处理后上机，平行5份样品考察回收率和RSD，具体结果如下：加标回收率为84.19%-87.67%，RSD为1.55%。

3. 结论

综上，本方案采用岛津的WondaSep MCX固相萃取小柱对鸡肉样品进行净化，Shim-pack GIST C18色谱柱进行分离，采用岛津串联质谱LCMS-8050检测分析，建立了鸡肉样品中金刚烷胺的检测方法，该方法回收率高、重现性好，适用于鸡肉样品中金刚烷胺的测定。